1999年 · 第15卷第04期

目的 探讨血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）苯那普利对单侧肾切除糖尿病大鼠肾皮质血小板衍化生长因子-B（PDGF-B）及其β受体表达的影响。 方法 苯那普利（10mg·kg-1·d-1灌胃）治疗4周后应用荧光分光光度法检测各组血浆和肾皮、髓质ACE活性；用免疫组织化学方法检测肾皮质Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白（FN）及PDGF-B蛋白表达；用Northern和Western杂交检测肾皮质PDGF-B mRNA及细胞膜PDGF-β受体蛋白表达。 结果 苯那普利能降低糖尿病大鼠血肌酐、相对肾重及肾皮质ACE活性。免疫组织化学结果提示苯那普利可抑制糖尿病肾皮质肾小球及肾小管Ⅳ型胶原、FN及PDGF-B蛋白高表达；Northern杂交表明肾皮质PDGF-B mRNA表达比对照组增加近3倍，Western杂交证实肾皮质细胞膜PDGF-β受体蛋白表达比对照组增加近1.5倍。苯那普利对肾皮质PDGF-B mRNA表达无明显影响，但它可明显抑制肾皮质细胞膜PDGF-β受体蛋白高表达。 结论 苯那普利对糖尿病大鼠肾脏保护作用至少部分与抑制PDGF-B及其β受体蛋白表达有关。

目的 探讨地塞米松、川芎嗪对活动期、静止期狼疮肾炎（LN）外周血单个核细胞（PBMC）白细胞介素-12（IL-12）表达的影响。 方法 应用地塞米松（10-5mol/L），川芎嗪（33 μg/ml）对LN患者PBMC培养，以正常人为对照，分别采用ELISA法和半定量RT-PCR法检测细胞上清液及细胞IL-12和IL-12 P40 mRNA表达。 结果 LN活动期、静止期较正常对照组IL-12蛋白、基因水平明显增高（P<0.01）。地塞米松明显抑制狼疮肾炎PBMC IL-12表达（P<0.01），而川芎嗪仅对活动期狼疮肾炎PBMC IL-12表达抑制明显（P<0.05），两种药物对正常人对照IL-12表达无明显抑制作用（P>0.05）。 结论 狼疮肾炎IL-12表达水平增高，这与PBMC处于异常活化状态有关；地塞米松、川芎嗪下调狼疮肾炎IL-12表达，提示它们通过免疫调节直接抑制了活化的狼疮肾炎PBMC表达IL-12。

目的 研究表皮生长因子（EGF）和维生素A（Vit A）对高浓度葡萄糖抑制腹膜间皮细胞增殖和分化的影响，以探讨EGF和Vit A在腹膜修复中的作用。 方法 采用胰蛋白酶消化法，从人腹膜组织中分离间皮细胞，并建立体外人腹膜间皮细胞（HPMC）培养模型；以3H-胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）掺入法测定细胞内DNA含量示细胞增殖程度；以免疫组织化学染色法，用图像分析仪测细胞表面角蛋白和波形蛋白（vimentin）表达量示细胞分化程度。 结果 随着葡萄糖浓度增高和培养时间的延长，HPMC 3H-TdR掺入降低；EGF和Vit A可增加HPMC对3H-TdR的掺入，但两者cpm值比较无显著性差异（P>0.05）；在含高浓度葡萄糖的培养液中分别加入EGF或Vit A后，EGF可明显促进HPMC的增殖，其3H-TdR掺入量明显增加，与Vit A组比较有显著性差异（P<0.05）。EGF和Vit A不影响细胞表面角蛋白和波形蛋白的表达。 结论 EGF和Vit A对腹膜间皮细胞的分化未显示出明显作用，但两者均可刺激细胞的增殖，特别是EGF可改善高浓度葡萄糖对腹膜间皮细胞的增殖抑制作用，这对CAPD患者损伤腹膜的再生修复以及促进其功能恢复可能有重要意义。

目的 探讨血清和尿中白细胞介素-8（IL-8）水平变化在系统性红斑狼疮（SLE）及狼疮肾炎（LN）中的临床意义。 方法 采用ELISA法对47例SLE患者（含37例LN）、13例原发性慢性肾小球肾炎和14例正常对照进行血清和尿中IL-8水平检测，比较分析其与SLE活动指数（SLEDAI）、肾脏损害的相关关系。 结果 SLE患者血清IL-8水平活动期为55.3 pg/ml（中位数，下同）静止期为26.38 pg/ml，明显高于正常对照组20.54 pg/ml（P<0.001），并且活动期高于静止期（P<0.05），血清IL-8水平与SLEDAI正相关（r=0.6003，P<0.05）；SLE患者尿IL-8显著高于正常对照组20.67 pg/ml（P<0.05），且LN组25.29 pg/ml明显高于SLE无肾炎组为21.1 pg/ml及原发性慢性肾小球肾炎组19.41 pg/ml（P值均<0.05）；肾脏组织病理狼疮活动指数（AI）高者其血清、尿IL-8水平显著高于AI低者（P<0.05）。 结论 血清IL-8水平可作为SLE活动度的敏感指标之一，而尿IL-8升高有助于判断LN患者肾脏的炎症活动情况。

目的 探讨造影剂导致肾血管张力改变的机理及其条件，以及内皮素和一氧化氮（NO）在其中的作用。 方法 采用离体灌流大鼠肾动脉直径测定，观察在不同造影剂、内皮素（ET）、NO及其它药物的刺激下，肾动脉直径的变化。 结果 造影剂能够显著地、特异性地提高大鼠肾动脉对ET缩血管作用的敏感性，此作用主要由ETA受体介导，与渗透压无关；造影剂能够显著地、特异性地降低大鼠肾动脉对NO扩张血管作用的敏感性，这一作用主要与渗透压有关。 结论 造影剂能特异性地改变大鼠肾动脉对ET及NO作用的敏感性。

目的 探讨血管紧张素受体拮抗剂-Losartan治疗高血压、动脉粥样硬化等心血管疾病的细胞作用机制。 方法 运用免疫荧光组织化学技术和激光共聚焦显微镜定量观察Losartan作用下的血管平滑肌细胞（VSMC）中细胞核增殖抗原（PCNA）、PDGF和c-myc原癌基因表达的平均荧光值。定量研究Losartan对体外培养血管平滑肌细胞增殖及血小板生长因子（PDGF）和c-myc癌基因表达变化的影响。 结果 Losartan作用下，VSMC中的PCNA、和c-myc癌基因的平均荧光值均低于对照组，而PDGF的平均荧光值与对照组相比无显著差异。 结论 Losartan抑制VSMC的增殖及c-myc原癌基因的表达。该作用与癌基因调控的蛋白产物作用机制有关，是Losartan治疗高血压，参与血管重塑的重要的机制。

目的 观察抑平舒降低血压、蛋白尿，延缓轻至中度慢性肾功能衰竭（CRF）进展的有效性和安全性。 方法 轻、中度CRF（Scr 134~354 μmol/L或Ccr 30~60 ml/min）病人118例，其中慢性肾小球肾炎71例，Ⅱ型糖尿病肾病5例，高血压肾小动脉硬化症30例，多囊肾病3例，其他肾脏病9例。先依次选用倍他乐克、双氢克尿噻、心痛定控制病人血压，待血压及肾功能稳定后，根据Ccr将病人分为轻度CRF组（Ccr 46~60ml/min）和中度CRF组（Ccr 30~45ml/min），每组病人再随机分为治疗组（抑平舒2.5~5.0 mg/qd n=80）和对照组（n=38），所有高血压病人继用上述降压药维持正常血压，随访期6个月。 结果 治疗组治疗后收缩压平均下降13 mmHg（1 kPa=7.5 mmHg）、舒张压平均下降9.5 mmHg和尿蛋白平均下降40%，均较治疗前明显下降，Ccr明显增加；对照组治疗后收缩压、Ccr明显下降，Scr、尿素明显增加，但舒张压和尿蛋白无明显差异，两组相比，治疗组降低血压、蛋白尿和延缓CRF进展的作用明显优于对照组。抑平舒对慢性肾炎病人延缓CRF进展的作用明显优于对照组，而对高血压肾小动脉硬化症病人，治疗组与对照组未见明显差异。抑平舒对轻、中度CRF，基础高血压和血压正常的病人均有疗效，对尿蛋白<2 g/日的病人，其肾保护作用明显优于尿蛋白>2 g/日的病人。所有病人在试验期间未见严重副作用。 结论 抑平舒具有良好的降血压和减少尿蛋白的作用，能明显延缓轻至中度CRF的进展，对慢性肾炎、尿蛋白<2 g/日的病人具有最显著的肾保护作用，副作用小，病人耐受性好。

目的 探讨甲状旁腺细胞增生和凋亡在严重肾性继发性甲状旁腺功能亢进（SHPT）发病机制中的作用。 方法 对5例伴严重SHPT的尿毒症患者的腺体，采用DNA片段末端标记作细胞凋亡的定量检测，并用免疫组织化学法观察增殖细胞核抗原（PCNA）、Bcl-2蛋白质表达。 结果 SHPT组甲状旁腺腺体细胞凋亡指数（1.1±1.2）较对照组（7.1±5.6）明显下降，结节性增生组织比弥漫增生组织更为显著。腺体细胞PCNA阳性率（6.10‰±3.77‰）比对照组（1.56‰±1.40‰）显著增加，Bcl-2表达（0.93‰±0.48‰）比对照组（0.44‰±0.32‰）亦上调；后两者与腺体细胞凋亡程度均呈负相关。 结论 尿毒症时甲状旁腺腺体细胞增生与凋亡失去平衡可能是导致SHPT发生的主要原因。

目的 以绿色荧光蛋白（Green fluorescence protein，GFP）为报告基因，构建纤溶酶原激活物抑制物-1（Plasminogen activator inhibitor-1，PAI-1）与GFP融合基因的真核表达质粒，在活细胞状态下观察PAI-1/GFP融合蛋白在大鼠系膜细胞中表达。 方法 利用聚合酶链反应（PCR）技术，从含有编码人类PAI-1（hPAI-1）全长cDNA序列的质粒pUC19-PAI-1中扩增出hPAI-1的编码区全长cDNA序列，定向克隆至真核表达载体pCMX-GFP。利用脂质体为转染载体，将表达质粒转染至体外培养的大鼠系膜细胞。利用Northern杂交、Western印迹、荧光显微镜直接观察以及纤维蛋白平板等方法检测PAI-1/GFP融合基因在大鼠系膜细胞的表达。 结果 转染组大鼠系膜细胞PAI-1 mRNA表达、细胞培养上清PAI-1活性均较对照组明显增高。大鼠系膜细胞表达的融合蛋白PAI-1/GFP对尿激酶型纤溶酶原激活物（u-PA）有明显的抑制活性，并能在荧光显微镜下激发绿色荧光。脂质体可以明显提高转染效率，24小时转染阳性细胞比例最高（33%±5.24%），与磷酸钙法（18%±3.21%）相比明显增高（P<0.05）。其蛋白质表达从转染8小时后开始，24~48小时达到最高，表达时间可持续1周。 结论 PAI-1/GFP融合基因的真核表达载体首次获得成功构建，并在肾小球系膜细胞获得了表达。肾小球系膜细胞所表达的融合蛋白PAI-1/GFP具有PAI-1与GFP的双重活性，可在活细胞状态下利用荧光显微镜直接观察其表达情况。

目的 探讨苯那普利对糖尿病肾小球内非酶促糖化反应的作用及机制。 方法 以链脲佐菌素诱发的单侧肾切除糖尿病大鼠为模型，检测苯那普利投药4周后，糖尿病大鼠血胰岛素水平、肾功能指标、血清及肾小球内糖化产物表达水平的改变。 结果 用药的糖尿病大鼠，肾功能指标［BUN从（17.38±2.22）mmol/L降至（12.83±2.09）mmol/L，P<0.05］、血清糖化蛋白水平［果糖胺从（5.303±0.123）mmol/L降至（2.003±0.125）mmol/L，P<0.05］明显下降，肾小球外基质（ECM）积聚被抑制，非酶糖化反应程度以及晚期糖化产物（AGEs）的蓄积亦有明显改善。血浆游离胰岛素水平升高［从（9.02±2.34）mU/L升至（16.7±7.13）mU/L，P<0.05］，因而高血糖程度稍有改善。 结论 苯那普利对糖尿病大鼠肾小球内基质蛋白的非酶糖化有显著的抑制作用，其作用途径与其部分改善胰岛功能、降低血糖或其他不依赖于血糖浓度降低的作用有关。

目的 评价氨甲酰血红蛋白（CarHb）在血液透析（HD）充分性中的意义。 方法 用高效液相色谱法测定正常对照组36例，非透析慢性肾功能衰竭51例和HD患者30例CarHb含量（以每克血红蛋白含氨甲酰缬氨酸微克数，μg CV/gHb表示）。HD组CarHb含量与尿素清除指数（Kt/V）、尿素降低率（URR）、平均时间尿素浓度（TACurea）和校正蛋白质分解率（nPCR）作相关分析。 结果 与对照组（30.0±6.1）比较，HD组CarHb含量（102.5±28.9）显著升高（P<0.01），但显著低于非透析组（139.9±52.0）（P<0.01）；Kt/V≤1.1组CarHb显著高于Kt/V>1.1组［（135.0±31.0）vs.（88.6±12.0），P<0.01］；CarHb与Kt/V，URR呈负相关，但与TACurea正相关。当Kt/V>1.1，nPCR<1.0 g·Kg-1·d-1组CarHb显著高于nPCR≥1.0 g·Kg-1·d-1组［（96.5±8.3）vs.（81.5±10.4），P<0.05］。 结论 CarHb是评价HD充分性的一项有用指标。

目的 探讨Ⅱ型糖尿病患者血清Ⅳ型胶原（CⅣ）的变化及其与糖尿病肾损害可能的关系和作用。 方法 采用放射免疫法对84例Ⅱ型糖尿病患者及45例正常人血清CⅣ水平进行检测。 结果 糖尿病（DM）患者血清CⅣ水平［（105.48±18.09）μg/L］明显高于对照组［（89.20±9.70）μg/L，P<0.01］；微量及大量白蛋白尿期患者［（106.46±18.59）μg/L，（120.90±15.54）μg/L］较对照组显著增高（P<0.01，P<0.001）；DM各组间血清CⅣ水平差异显著，随着24小时尿白蛋白排泄量（UAE）的增加及病程的延长，血清CⅣ水平递增，病程超过5年者显著高于病程短于5年者；血清CⅣ与血尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、24小时UAE及尿N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶（NAG）均呈显著正相关，与病程、空腹血糖（FBG）亦呈高度正相关。 结论 DM存在着胶原代谢的异常。血清CⅣ水平随DN的严重程度而明显增高。血清CⅣ可作为DN早期诊断的敏感指标。

目的 了解抗肾小球基底膜抗体（Anti-GBM）伴抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）阳性患者的临床病理特点。 方法 对我科近4年来68例Anti-GBM和（或）ANCA阳性患者进行Anti-GBM及ANCA检测，对其中4例两者均阳性患者进行临床病理分析。 结果 68例患者中4例两者均阳性，占全部Anti-GBM阳性患者的24%，占全部ANCA阳性患者的7%。该4例患者Anti-GBM的百分结合率较单纯Anti-GBM阳性患者低。4例中3例髓过氧化物酶-ANCA（MPO-ANCA）阳性，1例蛋白酶3-ANCA（PR3-ANCA）阳性，全身系统表现较多，与单纯性ANCA阳性患者相似。所检病例肾脏病理多为新月体肾炎，免疫荧光检查多为IgG、C3呈细颗粒样分布于GBM。虽经积极治疗，多数患者预后较差，类似单纯Anti-GBM肾炎。 结论 Anti-GBM伴ANCA阳性患者全身表现类似单纯ANCA相关小血管炎患者，但治疗效果及预后相对较差又类似于Anti-GBM肾炎患者。