1998年 · 第14卷第04期

目的建立一种简便、有效的分离嗜血杆菌的方法.方法利用万古霉素-杆菌肽-氯林可霉素巧克力法(VBC法)、血平板纸片法和传统巧克力法,对含正常菌群的标本进行嗜血杆菌的分离.结果巧克力平板上流感嗜血杆菌生长佳,但正常菌群影响嗜血杆菌分离,对100份模拟痰标本分离情况进行比较,结果VBC法、纸片法及巧克力法的分离率分别为76%、84%和64%,进行配对卡方检验,巧克力法与VBC法和纸片法的P值均小于0.01,其结果差异有显著性;对241份临床痰标本进行VBC法和纸片法分离,流感嗜血杆菌分离率分别为4.3%和4.9

目的 探讨系膜细胞α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达与细胞表型变化的关系。 方法 应用免疫组化技术并结合计算机图像分析，检测人类系膜增殖性肾小球肾炎（MsPGN）及局灶节段硬化性肾炎（FSGN）时系膜细胞内α-SMA的表达程度、系膜细胞增殖和细胞外基质分泌的情况。 结果 在系膜增殖性肾炎，随着系膜细胞增殖程度的加重，细胞外基质积聚增多，α-SMA的表达程度也增加，三者呈平行变化并具有高度相关性。在出现硬化病变后，系膜细胞增殖下降，α-SMA表达也降低，但细胞外基质未见减少。 结论 α-SMA可作为人类肾小球疾病状态下系膜细胞表型转化的稳定标志，它的出现标志着系膜细胞被激活并处于增殖/分泌表型。

目的建立一种简便、有效的分离嗜血杆菌的方法.方法利用万古霉素-杆菌肽-氯林可霉素巧克力法(VBC法)、血平板纸片法和传统巧克力法,对含正常菌群的标本进行嗜血杆菌的分离.结果巧克力平板上流感嗜血杆菌生长佳,但正常菌群影响嗜血杆菌分离,对100份模拟痰标本分离情况进行比较,结果VBC法、纸片法及巧克力法的分离率分别为76%、84%和64%,进行配对卡方检验,巧克力法与VBC法和纸片法的P值均小于0.01,其结果差异有显著性;对241份临床痰标本进行VBC法和纸片法分离,流感嗜血杆菌分离率分别为4.3%和4.9

目的 为了阐明凝血酶对肾小球系膜细胞细胞间粘附分子1（ICAM-1）表达的影响。 方法 利用体外培养的人肾小球系膜细胞，分别采用噻唑蓝掺入法、流式细胞术、间接免疫荧光、Northern杂交等方法分别观察了凝血酶对系膜细胞增殖和表达ICAM-1蛋白和mRNA的影响，并同时进行了人工重组水蛭素的阻断实验。 结果 凝血酶可以显著促进系膜细胞增殖以及系膜细胞ICAM-1蛋白和mRNA的表达，水蛭素可以特异地阻断凝血酶的这些作用。 结论 凝血酶不仅是肾小球内凝血过程的关键酶，而且具有促进系膜增殖和促进系膜细胞表达ICAM-1的作用。

目的 探讨环孢素A（CsA）和雷公藤单体T4（T4）的免疫抑制机制以及两药联合使用的效应，特别是小剂量CsA、T4联合获得较强免疫抑制效应的可能性。 方法 用3H-TdR掺入率法测定人系膜细胞（MsC）增殖，用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和ELISA法测定细胞IL-6mRNA表达及培养上清IL-6含量。 结果 CsA和T4均剂量依赖性抑制系膜细胞增殖及IL-6合成，两药联合产生明显的协同作用，小剂量CsA、T4联合与大剂量CsA作用相当。 结论 CsA和T4具有协同免疫抑制作用。

目的 观察骨调素（OPN）在大鼠实验性新月体肾炎肾脏组织中的表达及功能性抑制OPN的活性对巨噬细胞在肾脏局部浸润的影响。 方法 OPN在肾脏组织蛋白和基因水平的表达分别应用免疫组化双标记及原位杂交技术。 结果 在实验性新月体肾炎肾脏组织内OPN的表达明显升高，并与肾脏局部巨噬细胞的浸润、肾脏病理损害程度及肾功能的下降明显相关。应用抗OPN抗体治疗以后可显著抑制OPN在肾脏组织的表达，同时巨噬细胞在肾脏组织局部的浸润也明显减少，肾脏病理损害减轻、肾功能明显改善。 结论 OPN的高表达是实验性新月体肾炎发病过程中巨噬细胞在肾脏组织局部浸润的重要介导因子，抑制OPN的表达和功能可显著抑制肾脏局部巨噬细胞的聚集及改善肾功能。

目的 观察免疫吸附特异性清除循环肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对内毒素休克时肾功能的影响，并探讨其可能的机制。 方法 给新西兰白兔一次性静注内毒素8.0×109cfu/kg，1小时后经抗TNF-α单克隆抗体亲和免疫吸附柱进行血液灌流2小时，观察血压、血浆TNF-α活性、一氧化氮（NO）和内皮素-1（ET-1）含量、血浆丙二醛（MDA）含量和全血谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力、肾组织中MDA含量和超氧化物歧化酶（SOD）活力及肾功能等的变化。 结果 免疫吸附治疗后，血浆TNF-α水平迅速下降，低血压状态明显改善，NO、ET-1和氧自由基的生成显著减少，肾功能损害明显减轻，动物存活率提高。 结论 免疫吸附特异性清除循环TNF-α可减轻内毒素休克时肾损害的发生，明显改善肾功能。

目的 探讨黄芪当归合剂降脂及减少肾小球细胞外基质沉积的作用是否与肾脏转化生长因子（TGF）β1表达的改变有关。 方法 用嘌呤霉素致肾病综合征大鼠，随机分肾病对照、中药、西药治疗三组。用免疫组化及原位杂交观察肾脏TGFβ1表达及细胞外基质（ECM）沉积。以计算机图象分析进行半定量比较。 结果 正常组，可见TGFβ1蛋白及mRNA于肾小管上皮细胞微弱表达，肾小球系膜区TGFβ1mRNA弱表达。其余各组TGFβ1蛋白表达位于肾小管上皮细胞，mRNA表达位于肾小球系膜细胞及肾小管上皮细胞，而后者表达更明显。两治疗组TGFβ1表达较肾病组明显降低（P<0.001），两治疗组间比较，无显著性差异。两治疗组细胞外基质沉积均明显少于肾病对照组。 结论 黄芪当归合剂及HMGCoA还原酶抑制剂对肾病综合征鼠能明显减少肾小球细胞外基质沉积，同时使TGFβ1表达的下调。提示黄芪当归合剂可能通过这一下调作用减少肾小球细胞外基质的沉积。

目的 通过研究细菌毒素和炎症细胞因子诱导的间皮细胞（MCs）粘附分子表达及其对腹腔巨噬细胞功能的影响，探讨间皮细胞在腹膜抗菌防御中的作用。 方法 将体外培养的人腹膜间皮细胞以细菌脂多糖（LPS）、TNF-α或IL-1β刺激，采用间接免疫荧光染色技术，于激光扫描共聚焦显微镜下观察间皮细胞表面粘附分子（ICAM-1）的表达；采用细胞瑞氏染色方法，在普通光镜下计数腹腔巨噬细胞的粘附率。 结果 人腹膜间皮细胞表达ICAM-1，用LPS、TNF-α或IL-1β刺激间皮细胞后培养6小时，ICAM-1的表达高于对照组，有显著性差异（P<0.05）；各刺激组腹腔巨噬细胞的粘附率也明显高于对照组（P<0.05）。间皮细胞粘附分子的表达与腹腔巨噬细胞的粘附率呈正相关（r=0.918）。 结论 炎症介质和促炎症细胞因子通过刺激腹膜间皮细胞粘附分子表达增加，增强腹腔巨噬细胞的粘附和吞噬，在腹膜抗菌防御中起重要作用。

目的 进一步探讨微小病变型肾病综合征（MCNS）的发病有否TH1/TH2反应失衡。 方法 通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和双抗体夹心ELISA法，检测11例激素敏感型肾病综合征患儿外周血单个核细胞（PBMC）淋巴因子基因表达和蛋白产生。 结果 与正常对照组相比，NS患儿IL-10、IL-4基因表达和蛋白产生明显增高、IL-2、IL-6降低，干扰素（IFN）-γ和IL-5无明显差异。 结论 激素敏感性NS患儿TH1类和TH2类淋巴因子产生有重叠，不能用单一的TH1或TH2亚群过度活化解释，其淋巴因子产生异常可能是某些TH细胞克隆活化异常所致。