2014年 · 第49卷第04期

目的 观察3岁儿童从无龋到患龋过程中龋易感因素的变化,以期为低龄儿童龋齿风险评估提供相关依据.方法 选择144名34 ～38个月龄无龋儿童观察1年.在观察基线、6个月及12个月时分别采集口腔龈上集合菌斑和相关问卷调查;根据各观察期末不同患龋状况,将研究对象分成无龋组(12个月保持无龋)、6个月患龋组(6个月时有龋或充填体)和12个月患龋组(6个月时无龋、12个月时有龋或充填体).应用实时荧光定量PCR比较不同组间变形链球菌(Streptococcus mutans,Sm)和远缘链球菌(Streptococcus sobrinus,Ss)数量的差异.结果 130名儿童完成了12个月的复查,失访率为9.7％(14/144).在12个月观察期末,无龋组为58人,6个月患龋组为44人,12个月患龋组为28人.在基线、6个月和12个月时3组儿童的口腔卫生和饮食习惯自身前后对比差异均无统计学意义(P＞0.05).基线时无龋组进甜食和睡前进甜食或甜饮料的频率均显著低于6个月患龋组和12个月患龋组(P ＜0.001).基线时6个月患龋组Sm和Ss的数量[Sm拷贝数:(6.33±2.21)×103,Ss拷贝数:(1.99±0.45)×103]均显著高于无龋组[Sm拷贝数:(5.81 ±2.43)×103,Ss拷贝数:(1.34±0.53)×103] (P ＜0.05);6个月复查时,12个月患龋组Sm和Ss的数量[Sm拷贝数:(6.81 ±2.32)×103,Ss拷贝数:(1.97±1.43)×103]均显著高于无龋组[Sm拷贝数:(6.09±2.31)×103,Ss拷贝数:(1.34±0.55)×103] (P ＜0.05).结论 3岁儿童在临床检出龋齿前6个月时Sm和Ss数量已显著升高;高频率摄取甜食及睡前进甜食或甜饮料是儿童未来患龋的重要易感因素。

目的 观察树脂型和玻璃离子型两种窝沟封闭剂对第一恒磨牙的防龋效果,以期为儿童龋病预防工作提供依据.方法 采用随机、空白对照、受试者单盲、为期2年的研究设计,选取至少有1颗第一恒磨牙有深窝沟或非成洞龋的7～9岁儿童419人(共计664颗第一恒磨牙)为研究对象,采用分层随机的方法将入选儿童分为3组,R组(136人,219颗牙)使用光固化树脂型封闭剂(Helioseal F)封闭;G组(130人,218颗牙)使用光固化玻璃离子型封闭剂(FUJIⅦ)封闭;N组(153人,227颗牙)为空白对照组.在封闭后6、12及24个月时回访,观察3组儿童第一恒磨牙新生龋的发病情况,采用卡方检验分析3组间龋病发病率的差异,使用广义估计方程分析不同干预方式、纳入研究的牙位分布及封闭前窝沟状况对龋病发病率的影响.结果 R组2年龋病发病率为3.0％(6/197),G组为6.7％(13/193),N组为14.7％(29/197),3组间差异有统计学意义(P＜0.05),R组和G组间差异无统计学意义(P＞0.05).2年回访时与N组相比,使用树脂型封闭剂预防了79.6％的龋齿,使用玻璃离子型封闭剂预防了54.4％的龋齿.结论 树脂型封闭剂和玻璃离子型封闭剂均能有效预防第一恒磨牙龋病的发生,两种材料的防龋效果相似。

目的 研究用壳聚糖-胶原膜(chitosan-collagen membrane,CCM)引导种植体颊侧裂隙状缺损骨修复的效果.方法 壳聚糖与胶原以质量比40∶1和20∶1混合,经冻干得到CCM-1和CCM-2.比格犬10只,拔除下颌右侧4颗前磨牙和第一磨牙.4个月后,每只犬下颌骨右侧各植入4枚种植体,并在其颊侧制备裂隙状骨缺损,4个骨缺损处根据覆盖膜的种类及方式的不同,采用自身对照法分为4组:CCM-1组、CCM-2组、BG组及空白对照组,每组10只犬,各组观察样本量均为10个.术后4、8、12周各处死3、3、4只实验犬,取含种植体的标本,行组织学观察和硬组织形态学测量分析.结果 各实验组骨缺损区内均可见新生骨形成,随着时间延长逐渐增多、成熟.8周时,CCM-1组、CCM-2组和BG组的新生骨高度[(1.10 ±0.11) ～ (1.48 ±0.07) mm]均显著高于空白对照组[(0.74±0.12) mm](P＜0.05).12周时,CCM-1组新生骨高度[(1.91±0.25)mm]显著高于空白对照组[(1.20±0.34) mm] (P ＜0.05).各组间骨-种植体接触率、新生骨面积差异无统计学意义.结论 CCM可促进种植体颊侧裂隙状缺损内的骨组织再生并与种植体表面结合良好。

目的 评价抑制Notch信号通路后人牙髓细胞在细胞、代谢酶、基因3个水平的老化指标变化,探讨Notch信号通路对人牙髓细胞老化的作用.方法 采用γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S苯基甘氨酸t-丁酯抑制Notch信号通路后(抑制组)观察细胞形态,以正常培养基中添加抑制剂的溶剂二甲基亚砜为阴性对照组,检测两组碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、细胞老化相关β-半乳糖苷酶以及老化相关基因p53的表达.结果 抑制Notch信号通路后人牙髓细胞从第10代开始出现细胞形态老化的表现.抑制组自第8代即出现ALP阳性细胞减少,ALP活性下降为(35.36±2.55) U/g,显著低于阴性对照组[(49.76±4.30) U/g](t=4.989,P=0.008).抑制组第8代细胞即开始出现老化相关β-半乳糖苷酶阳性染色,第10代时出现大量阳性染色细胞.第10代时,抑制组细胞p53基因相对表达量(1.7±0.4)显著高于阴性对照组(设为1.0)(t=3.581,P=0.012).结论 抑制Notch信号通路后,人牙髓细胞在细胞、代谢酶、基因3个水平均出现老化前移表现,提示Notch信号通路可以影响人牙髓细胞的生命周期。

目的 探讨慢性牙周炎患者外周血淋巴细胞程序性死亡分子1(programmed death-1,PD-1)及其主要配体程序性死亡分子配体1(programmed death ligand-1,PD-L1)的表达及其意义,以阐明其在慢性牙周炎发生和发展中的作用.方法 采用流式细胞术检测30例慢性牙周炎患者(牙周炎组)、25慢性牙龈炎患者(牙龈炎组)及18例牙周健康对照者(健康对照组)外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞表面PD-1及PD-L1的表达,并检测16例慢性牙周炎患者进行牙周基础治疗6周后外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞PD-1及PD-L1的表达.两组间比较采用t检验,多组间比较采用方差分析,多个样本间的两两比较采用LSD-t检验或x2检验.结果 牙周炎组外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞表面PD-1的阳性表达率[(16.7±5.5)％、(20.8±5.1)％]及牙龈炎组二者的表达率[(14.2±6.1)％、(14.5±4.3)％]均显著高于健康对照组[分别为(9.5±2.1)％、(8.1±1.9)％](P值均＜0.05);牙周炎组外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞表面PD-L1的阳性表达率[(24.2±7.1)％、(15.3±6.8)％]及牙龈炎组二者的表达率[(12.4±6.0)％、(11.2±5.5)％]均显著高于健康对照组[(4.7±1.2)％和(3.2±2.3)％](P值均＜0.05).牙周基础治疗6周后,16例慢性牙周炎患者CD4+和CD8+T淋巴细胞PD-1、PD-L1的阳性表达率均显著降低,与治疗前相比差异均有统计学意义(P值均＜0.05).结论 慢性牙周炎患者外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞PD-1及PD-L1表达水平显著升高,与牙周炎症水平密切相关,牙周基础治疗可以下调慢性牙周炎患者外周血CD4+和CD8+T细胞表面PD-1及PD-L1的表达。

目的 观察Bmi-1基因对小鼠颌下腺形态与功能的影响,以期研究Bmi-1基因对小鼠颌下腺的增殖与衰老的作用.方法 利用组织学、组织化学及蛋白质印迹法比较分析4周龄12只雄性野生型小鼠(WT)和12只雄性Bmi-1基因敲除小鼠(Bmi-1-/-)颌下腺的重量、唾液分泌、形态、衰老与增殖能力等方面的表型差异.结果 颌下腺重量/体质量比WT小鼠[(1.89±0.15)μg]与Bmi-1-/-[(1.34±0.07) μg]比较,差异有统计学意义(P=0.003);单位体质量静态唾液总流率WT[(0.21±0.02) μg/rnin]及Bmi-1-/-[(0.10±0.02) μg/min]比较,Bmi-1-/-明显降低,差异有统计学意义(P=0.001);Bmi-1-/-颌下腺导管增多、颗粒曲管较明显、管径细、分支少;衰老相关的β-gal染色阳性细胞数增加(WT:0.00,Bmi-1-/-:0.18 ±0.02);此外,细胞增殖相关指标Ki-67阳性细胞百分率降低(WT:0.40 ～0.47,Bmi-1-/-:0.18 ～0.20)(P=0.000);蛋白质印迹法显示细胞周期蛋白p16(WT:1.00±0.12,Bmi-1-/-:0.00 ±0.00)(P =0.003)、蛋白质印迹方法p19(WT:0.97 ±0.09,Bmi-1-/-:5.09±0.21)(P=0.004)表达水平升高.结论 Bmi-1基因缺失可导致小鼠颌下腺呈衰老表型,功能异常。

目的 探讨多聚磷酸钠(sodium tripolyphosphate,STTP)与聚丙烯酸对单层重组Ⅰ型胶原模型的仿生矿化诱导作用,为STTP与聚丙烯酸在牙本质和骨胶原矿化诱导的扩展应用提供依据.方法 采用牛表皮Ⅰ型胶原在圆形盖玻片与透射电镜镍网表面建立单层重组胶原模型.联合应用组样本经含STTP与聚丙烯酸的模拟体液-硅酸盐水门汀树脂矿化系统诱导矿化.在矿化诱导第12、24、48和72h取出联合应用组样本(每个时间点样本量为18),用扫描电镜和透射电镜定性分析胶原微观形态学变化,并与矿化诱导72h、不含STTP和聚丙烯酸的空白组(样本量为18),以及仅含STTP或聚丙烯酸的对照组(STTP组、聚丙烯酸组,样本量均为18)进行比较.结果 空白组和2个对照组均未见胶原纤维内矿化现象.联合应用组在STTP与聚丙烯酸的协同诱导下矿化12 ～24 h后,重组胶原纤维表面可见纳米级球形电子致密物沉积;随着矿化时间延长,纤维表面无定形电子致密物逐渐消失,代之以胶原纤维内呈高度迭序排列的磷灰石纳米微晶,使纤维呈现典型的周期性横纹结构.结论 在模拟体液-硅酸盐水门汀树脂存在的情况下,联合应用STTP和聚丙烯酸能成功诱导磷灰石纳米微晶在不含非胶原蛋白的重组胶原内有序沉积,实现胶原纤维内矿化。

目的 检测纳米银涂层改性义齿基托的细胞毒性及抗菌性能,为纳米银涂层的临床应用提供依据.方法 根据基托树脂表面是否进行银离子溅射分为涂层组(根据离子溅射作用时间分为10、20、40、60、80、100 s涂层组)与基托对照组.用扫描电镜观察各组表面微观形貌,能谱分析表面元素;甲基噻唑基四唑比色分析涂层组、基托对照组、阴性对照组(聚乙烯)及阳性对照组(含50％二月桂酸二丁基锡的聚氯乙烯)与L929细胞共培养24、48、72 h的细胞相对增殖率及细胞毒性等级(每组每个时间点样本量为6);贴膜法检测纳米银涂层对变形链球菌及白色念珠菌的抗菌性能.结果 扫描电镜观察发现基托对照组试件表面光滑,各涂层组试件表面可见纳米银颗粒致密均匀地分布于基托树脂表面,颗粒呈圆形,直径10 nm.甲基噻唑基四唑比色法结果显示各涂层组试件与L929细胞共培养24、48、72 h后的细胞相对增殖率均高于100％,细胞毒性等级均为0级.贴膜法结果显示基托对照组均有菌落存在,而各涂层组均无菌落出现.结论 用离子溅射法可成功在义齿基托表面制备纳米银涂层,各涂层组材料均无细胞毒性,纳米银涂层改性义齿基托材料具有良好的抗菌性。

目的 研究紫外线辐照对纯钛喷砂酸蚀表面理化性能及吸附人纤连蛋白(human fibronectin,HFn)的影响,为评估紫外线-喷砂酸蚀纯钛表面的生物学活性提供参考.方法 分别制备喷砂酸蚀表面和紫外线-喷砂酸蚀表面的纯钛试件(每组60个),比较两组表面形貌、粗糙度、元素组成、润湿性及HFn吸附的差异.结果 两组有相似的多级孔洞及平均粗糙度.紫外线-喷砂酸蚀组纯钛试件表面有较低的C(22.83％)和较高的O(51.20％)并呈现亲水性;而喷砂酸蚀组呈现疏水性,其吸附10 min时HFn吸附量[(0.41±0.07)μg]显著高于紫外线-喷砂酸蚀组[(0.26±0.08)μg](P =0.007).结论 紫外线辐照并未改变纯钛喷砂酸蚀表面的形貌结构及粗糙度,但可降低表面碳氢化合物并增加羟基,吸附蛋白10 min时紫外线-喷砂酸蚀钛表面的HFn体外吸附量显著低于喷砂酸蚀钛表面.因此,紫外线-喷砂酸蚀钛表面的体外生物学活性尚未及喷砂酸蚀钛表面。

目的 检测镍钛-不锈钢激光焊复合弓丝的细胞毒性,并与不锈钢弓丝、镍钛弓丝比较,探讨复合弓丝的生物安全性.方法 将镍钛-不锈钢复合弓丝浸提液配置成体积分数为50％、40％、30％、20％、10％的稀释液,采用甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测培养24、48 h后各稀释液对小鼠成纤维细胞L929的细胞毒性.将复合弓丝、不锈钢弓丝、镍钛弓丝浸提液配置成体积分数为100％、75％、50％、25％的稀释液,采用MTT检测并比较48 h后各稀释液对L929的细胞毒性.结果 各浸提液细胞毒性均为0～1级.除20％复合弓丝浸提液外,相同体积分数复合弓丝浸提液与L929共培养48 h后A值均显著低于共培养24 h.100％、75％、50％、25％复合弓丝浸提液A值(1.964±0.122、2.084±0.056、2.056±0.071、2.096±0.050)均显著低于不锈钢弓丝浸提液(2.168 ±0.091、2.227±0.160、2.302±0.052、2.301±0.060)、镍钛弓丝浸提液(2.138±0.105、2.262±0.050、2.271 ±0.082、2.294 ±0.056) (P ＜0.05).结论 复合弓丝的细胞毒性作用与浸提液体积分数、培养时间有一定相关性,较不锈钢弓丝、镍钛弓丝明显.但复合弓丝的细胞毒性作用较小,在材料毒性反应安全级别范围内。

目的 定量检测青年人群正常牙本质中基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的含量及分布情况.方法 选择离体前磨牙30颗和第三磨牙27颗(患者年龄20 ～ 30岁),纵切成1.5 mm厚的牙本质片,磨除釉质后将冠部牙本质分成浅层和深层两部分,分别制备成牙本质粉,脱矿、提取蛋白后利用液相芯片技术定量检测MMP-2含量.结果 青年人群前磨牙牙本质浅层和深层MMP-2分别为(0.022±0.006)和(2.087±0.090) ng/mg,磨牙牙本质浅层和深层MMP-2含量分别为(0.336±0.037)和(3.312±0.308) ng/mg;各牙位深层牙本质MMP-2含量均显著高于浅层,磨牙同层次牙本质MMP-2含量均显著高于前磨牙(P＜0.05).结论 健康青年正常牙本质中含MMP-2,不同牙位及牙本质层次MMP-2含量不同。

牵引成骨术(distraction osteogenesis,DO)是近年发展和成熟起来的一种新技术,在颅颌面外科得到广泛应用.它是对骨切开后仍保留骨膜及软组织附着和血供的骨段施加特定的牵引力,以延长或扩宽骨骼,达到矫治骨骼畸形或缺损的外科技术[1].一、发展历史DO的应用最早可追溯到1905年,Codivilla首次应用该技术延长股骨。

下颌骨是形成面部下1/3外观的骨支架,是人体唯一联动关节的组成部分,对于维持正常的咀嚼、吞咽及咬合功能十分重要.各种病因导致的下颌骨缺损不仅直接破坏了患者的面部外形,还会对患者多方面的功能产生严重影响,造成生活质量下降,因此下颌骨缺损的修复重建一直是临床普遍关注的热点问题之一[1]。

干细胞是一类未分化的细胞,具有自我复制能力及多向分化潜能[1].依据其来源不同,大致可以分为两类:胚胎干细胞和成体干细胞.成体干细胞由于不涉及法律和道德问题,成为近期研究的热点[2].成体干细胞普遍存在于人体的各种器官[3],目前用于牙齿组织工程的成体干细胞主要为牙组织源性干细胞,包括成人牙髓干细胞、乳牙牙髓干细胞、牙周膜干细胞、根尖乳头干细胞及牙囊细胞[4].牙组织源性干细胞具有间充质干细胞的特点,可进行自体移植,是十分理想的种子细胞来源,在牙组织工程的应用中具有无可比拟的优势。

我国著名口腔医学专家、口腔医学教育家、我国儿童口腔医学的奠基人之一，北京大学口腔医学院·口腔医院教授、主任医师、研究生导师、国务院政府特殊津贴享受者李宏毅教授因病医治无效，于2014年2月3日凌晨3时40分在北京不幸逝世，享年99岁。