2011年 · 第46卷第03期

目的 建立婴幼儿血管瘤源性血管内皮细胞系(hemangioma-derived endothelial cell line,HemEC)及其动物模型.方法 采用组织块法进行HemEC体外培养,制作HemEC生长曲线,免疫组化法行Ⅷ因子相关抗原鉴定,流式细胞仪鉴定HemEC的血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor2,VEGFR-2)的表达,分析HemEC染色体核型,采用异体移植的方法将HemEC接种于裸鼠皮下,观察肿瘤的生长情况,进行组织病理学检查.结果 培养的细胞生长活跃,传到第16代时细胞增殖增快,自发永生化,共传代培养70代以上,体外培养时间1年,冻存、复苏多次,细胞仍生长良好,具有HemEC的形态学特征,细胞群体倍增时间约为22 h,Ⅷ因子和VEGFR-2均阳性表达,HemEC的染色体表现为非正常的二倍体特征,染色体数介于二倍体和三倍体之间,将其命名为XPTS-1.该婴幼儿血管瘤动物模型的组织病理学特征与婴幼儿血管瘤的组织病理学特征基本一致.结论 本研究建立的HemEC自发转化、永生化,其形态学特征和生物学特性符合HemEC的特性,既具有一般转化细胞系的饱和密度生长、接触性抑制、停泊依赖性生长等特性,又具有致瘤性等特性,符合婴幼儿血管瘤组织病理学特性,该模型的组织病理学特征与婴幼儿血管瘤的组织病理学特征基本一致。

目的 观察用最大发射波长为800 nm近红外荧光量子点(quantum dots,QD800)标记的昆明小鼠鳞状细胞癌U14细胞在体内颊部的可视化成像情况,为癌症的早期诊断、可视化观察和个体化治疗提供依据.方法 用具有穿膜作用肽段连接的QD800通过内吞标记U14细胞(U14-QD800),将含有不同细胞数的U14-QD800分别注射于裸鼠和昆明小鼠颊部黏膜下,在不同时间行活体成像,观察用QD800标记对U14细胞非侵入体内检测的敏感性和动态成像情况.结果 活体成像对裸鼠和昆明小鼠颊部可视化检测到的最少U 14-QD800细胞数分别为1×104和1×105个.1×104、1×105和1×106个U14-QD800细胞在裸鼠颊部能可视化成像持续的时间分别为3、7和16 d,1×105和1×106个U14-QD800细胞在昆明小鼠颊部能可视化成像持续的时间分别为3和10 d.结论 由于近红外荧光量子点对组织具有强的穿透力,在癌症的早期诊断、可视化观察和个体化治疗方面具有较大的发展前景。

目的 对2461例颌面部骨折病例进行临床回顾研究.方法 对广州中医药大学附属佛山中医院2003至2009年间因颌面部创伤住院的2461例骨折患者进行回顾分析,明确患者性别、年龄、损伤原因、职业、地域分布、血型、骨折部位、多处合并伤、损伤程度、首诊收入科室、治疗效果.结果 2461例颌面部骨折病例中,男女比例为4.28∶1;20～40岁为发病的高峰年龄(1424/2461,57.86%);道路交通伤938例(40.98%),在致伤原因中居首位;第三产业900例(78.53%),尤其从事交通运输业人员是最易骨折群体;颧骨复合体、鼻骨、下颌骨骨折分别占22.08%(955处/4325处)、20.67%(894处/4325处)和16.35%(707处/4325处),以上是颌面部骨折最好发部位;常合并颅骨、颅脑损伤及软组织挫裂伤,分别为21.74%、38.36%和48.84%.简明损伤评分法(abbrebiated injury scale,AIS)评分85.98%(2116例/2461例)患者小于2分;38.16%(939例/2461例)的患者首诊收入骨科.结论 颌面部骨折发病率逐年上升,交通事故为主要致伤原因,损伤程度较轻,常合并骨科损伤,男性较女性多见,发病人群以青壮年为主。

低度恶性筛状囊腺癌(low-grade cribriform cystadenocarcinoma,LGCCC),是一种罕见的涎腺肿瘤,现将一例腮腺LGCCC报告如下. 　　1.病例资料:患者,男性,44岁,2008年3月因发现右腮腺区肿块半年就诊.检查:肿块质地中等偏硬,无压痛,无面瘫,表面皮肤无红肿。

目的 了解胰岛素样生长因子Ⅰ(insudin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)在三维培养环境中对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLC)生长、分化的影响,以期为进一步研究牙周组织的再生提供实验依据.方法 从手术拔除的8颗前磨牙或第三磨牙中获取牙周膜组织,利用有限稀释法培养获得hPDLC.采用旋转细胞培养系统(rotary cell culture system,RCCS)建立三维培养环境,根据培养液中加入IGF-Ⅰ的不同质量浓度分为对照组(0 μg/L)和5个实验组(0.1、1、10、50及100μg/L),甲基噻唑基四唑(MTT)法检测细胞增殖情况.成骨诱导培养中加入上述不同质量浓度的IGF-Ⅰ,分光光度计法检测碱性磷酸酶(alkine phosphatase,ALP)浓度,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测骨钙素及Ⅰ型胶原基因表达水平.结果 三维培养下,各实验组IGF-Ⅰ对细胞增殖的作用均显著高于对照组(P＜0.05),其中IGF-Ⅰ 0.1μg/L组细胞增殖活性(0.219±0.021)与50μg/L组(0.287±0.011)、100 μg/L组(0.293±0.012)相比差异均有统计学意义(P＜0.05),其余组间差异均无统计学意义(P＞0.05).各实验组ALP活性均显著高于对照组(P＜0.05),1μg/L组(0.304±0.020)与10 μg/L组(0.310±0.013)相比差异无统计学意义,50 μg/L组(0.347±0.011)与100μg/L组(0.344±0.010)相比差异无统计学意义,但50、100 μg/L组显著高于1、10μg/L组,且四组均显著高于0.1 μg/L组(0.212±0.011),P＜0.05.Ⅰ型胶原及骨钙素的产物表达在mRNA水平及蛋白水平均呈现随浓度升高而升高的趋势.结论 在本实验三维培养条件下,IGF-Ⅰ对hPDLC的促增殖作用在0.1～100μg/L范围内呈浓度依赖性增强;100 μg/L IGF-Ⅰ在三维培养条件下具有明确的促hPDLC成骨向分化的作用。

目的 探讨视网膜母细胞瘤结合蛋白2(retinoblastoma binding protein 2,RBP-2)在人脂肪基质细胞(human adipose-derived stromal cell,hASC)成骨向分化中的作用.方法 设计靶向RBP-2小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)序列4对,将相应寡核苷酸构建到慢病毒载体pLL 3.7中,于293T细胞进行病毒包装用于RBP-2基因敲低.采用RBP-2敲低效果好的两个siRNA序列进行病毒包装,并以非沉默siRNA的pLL 3.7质粒包装的慢病毒为对照组,感染hASC,培养第14天定量检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性并行ALP染色及茜素红矿化结节染色,检测hASC成骨向分化的差异.结果 成功构建RBP-2基因RNA干扰慢病毒载体并获得相应慢病毒.慢病毒感染hASC后,RBP-2 mRNA及蛋白表达均被明显抑制.RBP-2 siRNA-1组和RBP-2 siRNA-4组的敲低效果较好,以此两组感染hASC.成骨诱导培养第14天RBP-2 siRNA-1组和RBP-2 siRNA-4组ALP活性[(299.2±22.7)、(224.3±17.7)U/g]高于对照组[(129.9±12.9)U/g,P＜0.05],RBP-2 siRNA-1组和RBP-2 siRNA-4组茜素红及ALP染色强于对照组.结论 成功构建的RBP-2 RNA干扰慢病毒能显著抑制RBP-2表达,并促进hASC向成骨细胞分化,即RBP-2可以抑制hASC的成骨向分化。

目的 观察3种锥度根管采用不同根管桩修复对牙体组织应力分布的影响,以期为临床合理选用根管桩提供实验依据.方法 分别建立35号K锉、ProTaper和Profile器械根管预备后的下颌第一磨牙三维有限元模型,并分别模拟纤维树脂桩、不锈钢根管桩和银汞合金桩根管固位修复.运用Marc有限元软件,采用中央垂直加载,分析3种不同根管桩修复时牙颈部和牙根部应力分布的状况.结果 不同根管锥度对3种根管固位方式下的应力分布趋势无明显影响.不锈钢根管桩应力集中部位主要位于远中牙根中上部,远中根管口最高Von-Mises应力约为45 Mpa;银汞桩应力集中部分主要位于远中根管口上端及髓腔内,远中根管口最高Von-Mises应力约为16 Mpa;纤维树脂桩应力分布较均匀,未见明显应力集中.结论 纤维桩是比较理想的根管固位形式,应力分布接近于无根管桩状态;不锈钢根管桩在根中部容易形成高应力集中,增加根折发生率。

目的 研究恒牙胚缺失情况下,乳牙牙髓在其牙根吸收中的作用.方法 通过手术方式建立恒牙胚缺失犬动物模型,定期拍摄X线片观察乳牙根吸收情况.获取乳牙牙根吸收各期颌骨及牙髓样本,采用组织学方法和半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析破牙细胞及其活化因子的分布情况.通过早期乳牙牙髓摘除术验证乳牙牙髓在牙根吸收中的作用.结果 组织学研究结果显示,恒牙胚缺失情况下乳磨牙牙根吸收时,破牙细胞主要在牙根的髓腔侧聚集.半定量RT-PCR结果显示,恒牙牙髓、乳牙牙髓、恒牙胚缺失乳磨牙牙根吸收中、晚期牙髓中NF-κB受体激活蛋白配体mRNA与β-肌动蛋白的灰度值比值分别为0.1314、0.1901、0.2111、0.6058(P＞0.05).早期乳牙牙髓摘除术后,恒牙胚缺失乳牙牙根吸收平均开始于第26周,晚于对照牙(第21周).结论 在恒牙胚缺失乳牙牙根吸收过程中,乳牙牙髓发挥了重要作用。

目的 观察牙髓卟啉单胞菌(Porphyromonas endodontalis,Pe)脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)对成骨细胞MC3T3-E1增殖、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和白细胞介素(IL)-6分泌情况的影响,探讨Pe-LPS在成骨细胞增殖与分化过程中的作用.方法 以不同质量浓度(10、25、50 mg/L)Pe-LPS加入成骨细胞培养体系,并设置未加Pe-LPS的对照组,作用12、24、48和72 h后采用甲基噻唑基四唑(MTT)法测量细胞相对增殖率(relative growth rate,RGR);上述各质量浓度Pe-LPS作用细胞6、12、24和48 h后,用酶动力学方法测定细胞内ALP活性;酶联免疫吸附法测定成骨细胞培养上清液中IL-6的浓度.结果 在Pe-LPS作用72 h后,与对照组比较25 mg/L组RGR降低为87.46%(P＜0.05),50 mg/L组下降到71.12%(P＜0.01);Pe-LPS作用24 h后,各质量浓度组ALP活性均下降(P＜0.05);25 mg/L组Pe-LPS作用细胞后IL-6的表达水平明显增加.结论 Pe-LPS诱导MC3T3-E1细胞分泌IL-6,促使细胞ALP活性降低,抑制了MC3T3-E1的分化;在Pe-LPS长时间毒力刺激作用下,MC3T3-E1的RGR也显著下降。

目的 探讨转录因子Sp3对釉蛋白基因(enamelin)的转录调控作用,以明确Sp3是否直接参与了釉蛋白基因的转录调控.方法 采用生物信息学软件预测釉蛋白基因上游调控区含有Sp3的结合位点;运用凝胶阻滞实验检测牙胚中的Sp3蛋白与釉蛋白调控区Sp3识别序列间的结合能力及其特异性;采用体外基因重组技术和双荧光素酶报告分析,将釉蛋白基因5'调控区构建至pGL3-basic载体中,并将其与Sp3表达质粒体外共转染至永生化成釉细胞株(LS8)中,检测Sp3对釉蛋白基因的激活.结果 凝胶阻滞实验与双荧光素酶报告分析结果显示,Sp3不能直接结合在釉蛋白上游调控区并激活其转录.结论 Sp3没有以直接作用的方式参与釉蛋白基因的转录调控。

目的 探讨直流电热处理后镍钛合金丝三点弯曲性能的变化规律,以期更好地发挥镍钛合金丝在临床治疗中的作用.方法 选择两种超弹性镍钛合金丝(弓丝A:圣马特超弹性镍钛合金牙齿矫形丝;弓丝B:SENTALLOY(R)超弹性镍钛合金丝)和两种热激活镍钛合金丝(弓丝C:圣马特热激活镍钛合金牙齿矫形丝;弓丝D:L&H镍钛丝),用加热仪分别对弓丝进行0(对照)、1.0、1.5、2.0、2.5 s的直流电热处理(恒定电流强度6.36 A);在37℃下利用三点弯曲实验检测弓丝的性能变化.结果 热处理后镍钛合金丝的平台期应力值均有所增加,加热2.0 s后弓丝A、B、C、D中点加载位移1.5 mm时,应力值分别为(4.33±0.07)、(4.52±0.08)、(4.07±0.05)、(3.27±0.15)N,与对照[分别为(3.85±0.11)、(3.28±0.09)、(3.62±0.07)、(2.91±0.23)N]相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在正畸治疗的不同阶段可利用直流电热处理的方法改变镍钛合金丝的形状和超弹性,但应注意控制加热的电流强度和时间,随着加热时间的延长,弓丝硬度增加。

目的 探讨3种常用口腔铸造合金模拟烤瓷前后的耐蚀性差异及氧化膜成分,以期为临床合理选择非贵金属合金提供依据.方法 用电感耦合等离子体原子发射光谱法(inductively coupled plasma atomic emission spectroscopy,ICP-AES)检测模拟烤瓷前后3种常用烤瓷非贵金属合金(镍铬合金、钴铬合金、镍钛合金)在达尔伯克改良伊格尔培养液中浸泡30 d后离子析出的种类和含量.同时用X射线光电子能谱(X-ray photoelectron spectroscopy,XPS)对模拟烤瓷后合金表面生成的氧化膜进行分析,扫描电镜(SEM)对合金表面腐蚀形态进行观察.结果 模拟烤瓷前3种合金离子总质量浓度由大到小依次为镍铬合金[(2.829±0.694)mg/L]、钴铬合金[(2.120±0.418)mg/L]、镍钛合金[(1.211±0.101)mg/L];镍铬合金组镍的质量浓度[(1.531±0.392)mg/L]＞镍钛合金组[(0.830±0.052)mg/L],钴和钼离子质量浓度由大到小为钴铬合金组[钴:(0.048±0.011)mg/L;钼:(1.562±0.333)mg/L]、镍铬合金组[钴:(0.034±0.002)mg/L;钼:(1.264±0.302)mg/L]、镍钛合金组[钴:(0.013±0.006)mg/L;钼:(0.151±0.026)mg/L],差异有统计学意义(P＜0.05).模拟烤瓷后3种合金离子析出总量[镍铬合金:(0.861±0.054)mg/L;钴铬合金:(0.695±0.327)mg/L;镍钛合金:(0.892±0.115)mg/L]均比未模拟烤瓷处理的合金离子析出总量少,差异有统计学意义(P＜0.05).XPS分析显示,模拟烤瓷后3种合金表面Cr2O3和钼、镍氧化物的含量增加.结论 3种常用烤瓷铸造合金中镍铬合金的离子析出量最大,耐蚀性最差;烤瓷加热处理可促进这3种合金生成连续的Cr2O3氧化膜,使合金的耐蚀性增强。

目的 测量正常(牙合)成年人硬腭部骨质厚度,以期为腭部支抗种植体的安全植入提供基础数据.方法 选择32名正常(牙合)、无正畸治疗史的成年人(男性16人,女性16人),年龄(30.1±6.5)岁.拍摄锥体束CT(cone beam computerized tomography,CBCT),以经过切牙孔后缘的冠状线为基线,向后与(牙合)平面垂直、与基线平行、在正中矢状线上每隔3 mm对硬腭部进行重建,选取7个与(牙合)平面垂直的冠状面,第1层为切牙孔后缘冠状面,第7层为距离切牙孔后缘18 mm的冠状面.在每个冠状面上确定位于正中矢状线上的腭中缝点为M点,左右侧硬腭水平部最外缘点为D点,均分M点与D点连线为4等份,从内到外依次命名为A、B、C点.测量各点对应处硬腭部骨质厚度.结果 硬腭部第1～7层骨质厚度的差异有统计学意义,骨质厚度从前向后逐渐递减;最厚处为12.6 mm,位于第1层冠状面D点;最薄处为2.7 mm,位于第7层冠状面B点;第2、3层冠状面骨质厚度最高为10.5 mm,最低为5.8 mm.硬腭部左右两侧骨质厚度差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 正常(牙合)成年人硬腭部距切牙孔后缘6 mm内可植入长度为5～10 mm的支抗种植体。

目的 了解北京社区居民中不同人群口腔卫生服务利用情况,并分析其相关影响因素,以期为今后口腔卫生服务的发展提供依据.方法 采取多阶段整群随机抽样的方法,抽取北京市新街口社区街道居民进行家庭健康询问和健康检查的入户调查,统计分析社区居民口腔卫生服务利用的影响因素.结果 调查社区居民2003户,共计4459人.社区居民1年内口腔就诊率为11.3%(502/4459).Logistic结果显示青年人(OR=2.072)、有医疗保障(OR=2.835)、就诊距离近(OR=3.535)、有就诊意愿(OR=2.595)以及认为自己口腔健康差(OR=2.014)是有利于社区居民口腔卫生服务利用的主要因素.结论 社区居民口腔卫生服务利用率较低,中老年人尤为严重.应提高居民对口腔疾病的认识和对口腔卫生服务的了解,同时完善医疗保障体系。

颞下颌关节紊乱病(TMD)是指累及颞下颌关节和(或)咀嚼肌系统、具有相关临床问题的一组疾病的总称,以关节疼痛、弹响和开口受限为主要临床症状.流行病学调查显示,TMD具有明显的性别差异,女性患者明显多于男性,且以20～40岁女性患者最为多见。

前讲主要介绍了先天性缺牙的主要致病基因,本次讲座将重点介绍先天性缺牙的主要临床表现. 　　一、口腔表现 　　1.先天性牙齿缺失:患者表现为先天性牙齿缺失,缺失数目从1颗至全口无牙不等.个别先天性缺牙患者,若无明显的缺牙间隙,常不易发现,如果乳牙未脱落,也不易发现.缺失牙齿较多时可对咀嚼功能和美观有明显影响。

种植义齿技术是建立在骨整合理论的基础上,所谓骨整合即种植体表面与骨之间的直接结合,在自体骨上已达到理想的效果[1].随着生物医学、材料学、仿生学的发展,组织工程骨得到了迅速的发展,并以其优异的性能克服了自体和异体骨组织移植的缺点,有望在人体硬组织缺损修复中得到广泛应用[2]。