2002年 · 第22卷第05期

目的应用硝普钠(SNP)作为一氧化氮(NO)供体观察NO对 60Coγ射线照射的人胚肺成纤维细胞(HELF)增殖活力及其分泌功能的影响,以探讨NO的抗纤维化机理.方法应用MTT比色法、Griess一氧化氮浓度测定法、免疫组化和原位杂交等方法检测成纤维细胞增殖活性及内皮素(ET)、血管紧张素II(AII)和转化生长因子β(TGFβ)的表达情况.结果低剂量的 60Coγ射线照射对人胚肺成纤维细胞有促增殖作用,以5 Gy剂量的促增殖作用最强;30 h以内,硝普钠基本以线性方式释放NO,平均增幅为4.25 μmol/L,初步认为4～5 μmol/L的NO为抑制成纤维细胞增生的最佳浓度;未照射成纤维细胞不表达或仅微弱表达ET、AII和TGFβ;照后细胞ET和TGFβ mRNA及其蛋白表达显著增强,AII合成增加.结论 NO供体硝普钠可明显抑制成纤维细胞的过度增殖和分泌活动,随浓度的加大,抑制作用增强,呈明显的剂量依赖关系.

目的研究γ射线对树突状细胞(DCs)生长及其功能的影响.方法采用γ射线对单核细胞来源的DCs进行照射,经流式细胞仪表型分析、活细胞计数、混合淋巴细胞反应等方法测定γ射线对DCs的生物学效应.结果γ射线照射抑制DCs的体外增殖,显著地下调DCs表达GM-CSFR、flt-3和gp130分子,但能上调DCs表达CD80、CD86和HLA-DR分子;同时γ射线照射增强DCs激发T细胞的增殖,抑制DCs对抗原摄取的能力.结论γ射线照射能影响DCs的成熟和功能.

目的研究苦豆子总碱对辐射损伤小鼠脂质过氧化作用的影响.方法小鼠腹腔注射不同剂量的苦豆子总碱, 60Co γ射线全身均匀照射、吸收剂量5.0 Gy,检测苦豆子总碱对肝组织中丙二醛(MDA)含量、血清谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、超氧化物歧化酶(SOD)以及全血中硒-谷胱苷肽过氧化物酶(Se-GSH-PX)活力的影响.结果辐射损伤后小鼠脱毛明显、体重减轻、尾部出现多个出血斑,MDA含量增高,SOD及GSH-PX活力下降,GPT、GOT活力增加.苦豆子总碱可促进上述指标恢复.结论苦豆子总碱对受照小鼠具有一定的保护作用,其机理可能与抗氧化作用有关.

目的研究低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸生精细胞凋亡的适应性反应.方法应用原位末端标记(TUNEL)和常规HE染色法分别结合光镜定量地观察75 mGy X射线照射诱导小鼠睾丸生精细胞在生精周期中凋亡的适应性反应.结果当1.0、2.0或3.0 Gy(攻击剂量,D2)X射线照射前6 h给予75 mGy(诱导剂量,D1)预照射时明显减轻D2对睾丸精原细胞和精母细胞的凋亡损伤作用,而对精子细胞影响不明显.当1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 Gy(D2)X射线照射前3、6、12、24 h给予75 mGy (D1)预照射时,发现当D2剂量较小(1.0、1.5、2.0 Gy)时,精原细胞和精母细胞的凋亡百分率减少出现较早、较明显,而且持续时间较长;反之,当D2剂量较大(2.5和3.0 Gy)时,精原细胞和精母细胞的凋亡百分率减少只在照后6 h出现,而且不显著.结论低剂量电离辐射可以诱导精原细胞和精母细胞凋亡的适应性反应,并与D1和D2间隔时间及D2剂量有关.

目的研究小鼠肠上皮细胞在正常及轻型肠型放射病早期差异基因表达的图谱.方法以异硫氰酸胍一步法提取小鼠正常及12 Gy全身照射后3 h和96 h肠上皮细胞的总RNA,经磁珠法分离mRNA,采用MMLV反转酶标志获得高比活性的 32P cDNA探针(0.5×106*min-1\5μg-1),与含癌/抑癌基因、细胞周期调节、信号传导等14大类共588种鼠源性相关基因的cDNA微阵列膜杂交.结果绘制了小鼠轻型肠型放射病早期与肠上皮再生期表达基因和差异表达基因图谱,发现12 Gy辐射诱导早期(3 h),主要为基因表达受到抑制,而再生期(96 h)基因表达明显增强,并有新的表达基因出现.此外见cdk抑制蛋白Ⅰ基因在辐射损伤时呈稳定高表达水平.结论 12 Gy辐射损伤96 h时基因表达综合效应表现为肠上皮损伤修复,cdk抑制蛋白Ⅰ基因在辐射损伤肠上皮中的高表达,提示其可能在监测肠上皮辐射损伤方面具有应用前景.

目的探讨局部照射对创伤愈合过程中伤口(Fb)TGFβ1及TGFβR1表达的影响及意义.方法将132只Wistar大鼠分为单纯创伤组(对照组)和照射复合创伤组(照射组),用免疫组织化学、原位杂交和图像分析方法检测两组伤口愈合过程中伤后1～60 d各时间点伤口成纤维细胞中TGFβ1、TGFβR1蛋白及TGFβ1 mRNA表达的变化规律.结果单纯创伤组伤口成纤维细胞TGFβ1、TGFβR1表达有明显的时相性,伤后2～21 d可见表达,10 d为表达高峰;照射复合创伤组其表达减弱,且表达时相延长,伤后28 d仍有表达.结论照射抑制伤口成纤维细胞内源性TGFβ1及TGFβR1的表达,表明照射使成纤维细胞自分泌TGFβ1功能减弱并对外源性TGFβ1的反应性减弱.

目的研究放射性核素内照射诱发大鼠外周血淋巴细胞HPRT基因突变的剂量效应关系.方法大鼠尾静脉注入晚期混合裂变产物,5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)法检测不同累积剂量和不同剂量率内照射诱发外周血淋巴细胞HPRT基因突变,并拟合剂量效应关系.结果随着累积剂量和剂量率的增加,HPRT基因突变频率不断上升,其剂量效应关系符合线性模型.结论 BrdU法是一种快速、简便、较敏感的检测辐射诱发HPRT基因突变的方法,HPRT基因突变可以作为辐射生物剂量计.

目的探讨放疗过程中放疗患者血清血管内皮生长因子(VEGF)升高的机理,以及VEGF反义硫代寡核苷酸(Antisense oligodeoxynucleotide.AS-ODNs)对肝癌细胞VEGF表达分泌的抑制作用.方法动态观察肿瘤患者放疗期间血清VEGF变化;体外培养肿瘤细胞,观察放疗对肿瘤细胞VEGF表达分泌的诱导作用及反义寡核苷酸的抑制效应.结果肿瘤患者血清VEGF浓度在放疗期开始后逐渐升高,1～2周达到峰值后开始下降,到第6周时基本恢复到正常.肝癌细胞受X射线照射后VEGF的分泌量较对照组明显升高,VEGF反义核酸组癌细胞VEGF蛋白表达水平较单纯照射组显著下降(P<0.01).结论放疗可诱导肿瘤细胞中VEGF的表达分泌,放疗患者放疗过程中血清VEGF浓度升高可能是由于癌细胞受照射后VEGF表达、分泌增加所致,VEGF反义寡核苷酸对放疗诱导的VEGF高表达有较好的抑制作用.

目的观察室内高氡暴露居民外周血淋巴细胞DNA损伤及微核细胞发生率.方法采用单核细胞凝胶电泳和微核检测两种方法,观察了我国甘肃省窑洞内氡暴露居民及对照居民外周血淋巴细胞DNA损伤及微核细胞发生率.结果窑洞和普通住房居民(室内空气中氡浓度分别为200～350 Bq*m-3及37.5～77.1 Bq\5m-3)的细胞迁移发生率分别为1.68%和1.43%,人发生细胞迁移百分率分别为57.1%和54.3%.50岁以上窑洞和普通住房居民细胞迁移和人发生细胞迁移率分别为2.14%、75.0%和2.00%、64.7%.窑洞和普通住房居民微核细胞发生率分别为1.07‰和0.78‰.结论窑洞居民外周血淋巴细胞DNA损伤及微核细胞发生率略高于普通住房居民,P值接近0.05.

目的研究在给定治疗剂量和治疗时间的情况下,使用不等分次剂量(UEFD)治疗方案是否能提高治疗效果.方法参考细胞存活率的计算公式,推导出分次治疗时的肿瘤控制概率(TCP)的计算模型,然后在假设的全疗程或1周内分次剂量以等比数列、等差数列递增或递减等4种分次剂量方案及肿瘤生物学参数的情况下,计算给定总治疗剂量D所能获得的TCP值,作出TCP与D的关系曲线及TCD50与等比或等差之间的关系曲线.结果上述4种UEFD方案所得到的TCP-D曲线均好于等分次剂量(EFD)的结果,而且分次剂量间变化幅度越大,获得的曲线越好.递减分次剂量治疗好于递增分次剂量治疗,但分次剂量间变化幅度小时两者间的差异不明显.结论从理论上讲,在给定治疗剂量及治疗时间的情况下用UEFD治疗能获得比EFD治疗更好的结果.

目的尝试建立一种微剂量估算模式,评估靶细胞核对放射性药物的准确吸收剂量率.方法以 99Tcm-甲氧基异丁基异腈(MIBI)为例,运用冰冻切片光镜放射自显影技术,观察小鼠尾静脉注射 99Tcm-MIBI 2 h后,肝脏内放射性药物在亚细胞水平分布情况,探索一种符合实际分布情况的数学模式来估算肝细胞核的微剂量率,并与医学内照射剂量(MIRD)估算方式比较,判断两种剂量率估算方法的准确性.结果 99Tcm-MIBI在肝脏亚细胞水平的分布是不均匀的,实际肝细胞核微剂量率数值与利用MIRD模式估算的结果差异有非常显著性(P＜0.01).结论在 99Tcm标记药物非均匀分布情况下,本文作者所建立的微剂量率估算模型,可替代MIRD模式,较准确地估算微剂量率.