2020年 · 第36卷第03期

目的 比较多种抗原修复方法在肾组织石蜡切片免疫荧光技术中的应用，探讨最佳抗原修复法。 方法 选取2018年6月至2019年6月期间郑州大学第一附属医院肾脏病理中心的45例肾活检组织标本为研究对象，其中狼疮肾炎、膜性肾病、IgA肾病各10例及淀粉样变性肾病15例。分别用5种抗原修复法处理各组肾组织石蜡切片。按照标本来源和抗原修复方法分为6组：对照组（冰冻切片标本）、高压热修复联合胰蛋白酶消化双修复（高压热联合胰酶）组、微波热修复联合胰蛋白酶消化双修复（微波热联合胰酶）组、高压热修复（高压热）组、微波热修复（微波热）组、胃蛋白酶消化（胃蛋白酶）组。分析和比较5种热修复抗原方法的石蜡切片与冰冻切片免疫荧光染色和半定量评分的差异。 结果 高压热联合胰酶、微波热联合胰酶组肾组织石蜡切片的免疫荧光染色结果与对照组一致，与对照组比较，两组免疫荧光半定量评分的差异无统计学意义（均P>0.05）。高压热组、微波热组和胃蛋白酶组石蜡切片免疫荧光染色结果较对照组假阴性率高，免疫荧光半定量评分的差异有统计学意义（均P<0.05）。 结论 高压热修复联合胰蛋白酶消化双修复法与微波热修复联合胰蛋白酶消化双修复法为石蜡切片的最佳抗原修复方法。

目的 观察维持性血液透析（maintenance hemodialysis，MHD）合并继发性甲状旁腺功能亢进（secondary hyperparathyroidism，SHPT）患者行甲状旁腺切除术（parathyroidectomy，PTX）后腹主动脉钙化及生化指标的发展变化。 方法 回顾性分析完成2年随访的严重SHPT患者，按是否行PTX分成PTX手术组和非手术组，观察术后2年腹主动脉钙化评分（abdominal aortic calcification score，AACS）、血清全段甲状旁腺素（iPTH）、血钙、血磷等变化。PTX手术组按照术后2年腹主动脉钙化有无进展分为进展组和非进展组，对比两组的年龄、透析龄、iPTH、血钙、血磷、钙磷乘积等指标，分析腹主动脉钙化进展的相关因素。 结果 共纳入44例MHD合并SHPT患者，PTX手术组26例，非手术组18例。PTX手术组与非手术组基线资料比较，透析龄差异有统计学意义（P<0.05），而性别、年龄、高血压史等差异均无统计学意义。与术前比较，PTX手术组患者术后2年血iPTH、血钙、血磷均降低（均P<0.05），AACS前后差异无统计学意义。患者术后2年有8例（30.77%）腹主动脉钙化加速进展，8例（30.77%）腹主动脉钙化好转，10例（38.46%）腹主动脉钙化稳定。患者术后2年腹主动脉钙化非进展组iPTH值低于进展组[（20.62±6.44）ng/L比（132.72±76.83）ng/L，P<0.05]，而非进展组术前AACS高于进展组[（13.11±2.71）分比（2.00±1.41）分，P<0.05]。非手术组患者2年后AACS高于基线水平[（10.44±1.65）分比（8.05±1.26）分，P<0.05]，血磷及钙磷乘积显著下降（均P<0.05），iPTH、血钙等水平无明显变化（均P>0.05）。Pearson相关分析结果显示，PTX手术组术后2年AACS相对于术前的下降值与iPTH下降值（r=0.534，P=0.012）、血钙下降值（r=0.643，P=0.004）、血磷下降值（r=0.897，P<0.001）、钙磷乘积的下降值（r=0.568，P=0.021）呈正相关，与术前AACS值呈负相关（r=-0.647，P=0.014）。 结论 小样本资料显示，相比非手术治疗，PTX可长期纠正甲状旁腺素、钙、磷代谢紊乱，并有阻止腹主动脉钙化进展甚至逆转血管钙化的可能，而腹主动脉钙化逆转可能与iPTH、血Ca、血P、钙磷乘积的下降程度相关。

【目的】 探讨腹主动脉钙化评分（abdominal aortic calcification score，AACS）与腹膜透析患者心脑血管预后的关系。 方法 研究对象来自2011年7月至2014年7月期间在上海交通大学医学院附属仁济医院接受规律腹透治疗的患者。采用腹部侧位X线摄片评估所有入选者腹主动脉钙化程度，并根据Kauppila评分系统行AACS评分。根据AACS三分位数将患者分为无钙化组（AACS=0）、轻中度钙化组（0<AACS≤4）和重度钙化组（4<AACS≤24）。随访终点时间为研究终止日期（2018年8月31日），或退出腹膜透析，或患者死亡。采用竞争风险模型分析AACS与腹膜透析患者心脑血管预后的关系。 结果 共292例腹膜透析患者入选本研究，男性160例（54.8%），年龄（57.1±15.2）岁，中位腹膜透析龄28.4（12.0，57.8）月，中位AACS 2.0（0.0，6.0）分。无钙化组125例，轻中度钙化组72例，重度钙化组95例。有序Logistic回归分析结果显示，年龄（OR=1.081，95%CI 1.057～1.106，P<0.001）、腹膜透析龄（OR=1.012，95%CI 1.004～1.019，P=0.003）、合并糖尿病（OR=2.554，95%CI 1.415～4.609，P=0.002）和有心脑血管疾病（CVD）（OR=1.919，95%CI 1.108～3.325，P=0.020）是AACS的独立相关因素。随访期间共有65例患者发生CVD事件，50例CVD相关死亡。与无钙化组相比，轻中度及重度钙化组患者中CVD事件累积发生率和累积病死率显著升高（分别Gray=27.81，P<0.001；Gray=20.91，P<0.001）。AACS是腹膜透析患者发生CVD事件（轻中度钙化组比无钙化组：SHR=2.823，95% CI 1.333～5.970，P=0.007；重度钙化组比无钙化组：SHR=3.063，95%CI 1.460～6.430，P=0.003）和CVD相关死亡（SHR=2.590，95%CI 1.132～5.920，P=0.024）的独立预测因子。 结论 年龄、腹膜透析龄、合并糖尿病及有心脑血管疾病是腹膜透析患者AACS升高的独立相关因素，AACS可预测腹膜透析患者心脑血管事件和心脑血管死亡的风险。

目的 探讨腹膜透析患者腹膜厚度与基线溶质转运功能的关系，分析腹膜转运功能的影响因素。 方法 入选2017年1月至2019年6月福建省龙岩市第二医院肾内科收治的非糖尿病终末期肾脏病（ESRD）患者为研究对象。腹膜透析置管术前用彩色超声仪测量患者壁层腹膜厚度。腹膜透析治疗后1个月行标准腹膜平衡试验（PET）检查，以4 h腹透液的矫正肌酐与2 h血清肌酐的比值（D/Pcr）作为基线溶质转运指标，并按照D/Pcr评估结果分为高/高平均转运（H）组（D/Pcr≥0.65）和低/低平均转运（L）组（D/Pcr<0.65）。比较两组患者临床资料、壁层腹膜厚度和腹膜透析相关指标的差异；二元Logistic回归法分析腹膜转运功能的影响因素。 结果 共纳入70例非糖尿病ESRD患者，H组患者腹膜超滤量显著低于L组；腹膜内生肌酐清除率（Ccr）和腹膜厚度显著高于L组（均P<0.05）。Pearson及Spearman相关性分析结果显示，腹膜透析患者壁层腹膜厚度与溶质转运指标D/Pcr（r=0.673）、腹膜内生肌酐清除率（Ccr，r=0.261）呈正相关，与腹膜透析超滤量呈负相关（r=-0.365，均P<0.05）。偏相关分析结果显示，腹膜厚度与溶质转运指标D/Pcr（r=0.539）、腹膜Ccr（r=0.338）呈正相关（均P<0.05）。二元Logistic回归分析结果显示，腹膜增厚是腹膜转运功能的危险因素（OR=1.175，95%CI 1.009～1.369，P=0.038）。 结论 非糖尿病腹膜透析患者壁层腹膜厚度与基线溶质转运指标呈正相关，腹膜增厚是影响腹膜转运功能的危险因素。

目的 分析小儿原发性肾病综合征（primary nephrotic syndrome，PNS）在临床上确诊后未即时实施常规糖皮质激素治疗的现象，探讨不同原因以及转归。 方法 收集浙江大学医学院附属儿童医院肾内科2005年1月1日至2014年12月31日收治的初次发病的PNS、确诊后未即时使用常规糖皮质激素治疗的患儿的临床资料，进行回顾性分析并随访。 结果 研究期间共收治初次发病PNS患儿1 431例，男1 061例，女370例，其中130例未即时进行常规糖皮质激素治疗，占9.1%。130例未即时进行常规糖皮质激素治疗患儿中，75例患儿初发后经对症处理自行缓解；23例直接用促肾上腺皮质激素（ACTH）治疗；1例直接用霉酚酸酯（MMF）治疗；31例拒绝用糖皮质激素或免疫抑制剂治疗。自行缓解的75例中，经5～10年随访有16例持续缓解，39例复发后采用糖皮质激素治疗，6例复发后采用ACTH治疗，失访14例。初治方案为ACTH的29例患儿中持续缓解7例。拒绝用糖皮质激素或免疫抑制剂治疗31例中，死亡1例。单独应用MMF控制不佳。 结论 儿童PNS初次发病时，有小部分患儿呈现自行缓解现象，但大多数随后即复发，需要常规糖皮质激素治疗；一般常规糖皮质激素治疗不需要延长等待时间，除非患儿已经发生自行缓解。部分患儿家属不接受糖皮质激素治疗，需要加强沟通。在肾病发病伊始即行ACTH治疗患儿中有长期缓解者，可以进一步观察和研究，以了解ACTH作为初始方案的有效性和安全性。

目的 总结和分析糖尿病肾病（diabetic kidney disease，DKD）与非糖尿病肾病（non-diabetic kidney disease，NDKD）患者临床病理特点，为临床2型糖尿病合并慢性肾脏病患者肾活检指征提供循证医学证据。 方法 通过南方医科大学南方医院大数据库收集2002年2月至2018年6月在该院接受肾活检的2型糖尿病合并慢性肾脏病患者，并根据肾活检结果将其分为DKD组和NDKD组（包括DKD合并NDKD），比较两组间临床表现及病理类型特点，并采用Logistic回归模型分析DKD和NDKD患者的相关因素。 结果 共纳入507例患者，DKD患者114例（22.5%），NDKD患者393例（77.5%）。病理表现：NDKD的最常见病理类型为膜性肾病（30.0%）和IgA肾病（19.1%），其中有5.6%患者为DKD合并NDKD。临床表现：与NDKD组患者相比，DKD组患者有更长的糖尿病史（>1年，76.3%比36.1%，P<0.001），更易发生糖尿病视网膜病变（42.1%比4.8%，P<0.001），24 h尿蛋白量更高[3.69（1.70，6.74）g比2.21（0.91，4.97）g，P<0.001]，血肌酐更高[117.5（85.8，194.5）μmol/L比89.0（68.0，143.8）μmol/L，P<0.001]，血红蛋白更低[（105.07±20.85）g/L比（124.41±25.02）g/L，P=0.002]，胆固醇更低[（5.69±1.87）mmol/L比（6.43±2.75）mmol/L，P=0.001]。Logistic回归分析显示，糖尿病史（OR=4.162，95%CI 1.717～10.098，P=0.002）、较高收缩压（每增加1 mmHg，OR=1.028，95%CI 1.011～1.045，P=0.001）、降压药服用史（OR=3.141，95%CI 1.496～6.591，P=0.002）、糖尿病视网膜病变（OR=5.561，95%CI 2.361～13.100，P<0.001）、较高糖化血红蛋白（每增加1%，OR=1.680，95%CI 1.333～2.118，P<0.001）是DKD的相关因素，而血尿（OR=2.781，95%CI 1.334～5.798，P=0.006）和较高血红蛋白（每增加1 g/L，OR=1.022，95%CI 1.008～1.037，P=0.002）则为NDKD的相关因素。 结论 DKD与NDKD之间的临床表现及病理类型存在差异，糖尿病病史、眼底检查、大量蛋白尿、降压药服用史、较高的糖化血红蛋白水平对DKD的诊断有较好的预测作用，而血尿和较高的血红蛋白水平对NDKD的诊断有一定指导意义。糖尿病合并慢性肾脏病患者行肾活检的指征需根据各临床表现综合分析。

目的 探讨赖氨酸甲基转移酶SET8介导AKT信号通路在调控高磷诱导的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells, VSMCs）钙化中的作用及机制。 方法 （1）选取雄性SD大鼠进行体内实验并随机分为假手术组和慢性肾衰竭血管钙化组。取胸主动脉，采用von Kossa染色检测钙化情况；免疫组化法检测SET8和Caspase-3表达情况。（2）体外实验进行原代VSMCs培养，将细胞随机分为正常组和高磷组（10 mmol/L β-甘油磷酸）。采用邻甲酚酞络合酮比色法及茜素红染色检测细胞钙化情况；流式细胞法检测细胞凋亡情况；RT-PCR和Western印迹法检测SET8、AKT和Caspase-3的表达。（3）为进一步验证SET8在VSMCs凋亡中的作用，采用脂质体转染法，分3组：SET8-短发夹RNA（shRNA）组、空质粒组和正常对照组。采用邻甲酚酞络合酮比色法及茜素红染色检测细胞钙化情况；流式细胞法检测细胞凋亡情况；RT-PCR和Western印迹法检测SET8、AKT、Caspase-3的表达。 结果 （1）体内实验中，慢性肾衰竭血管钙化组的血管钙盐沉积量明显高于假手术组（P<0.05）；免疫组化结果提示，与假手术组相比，血管钙化组SET8表达明显降低，Caspase-3表达明显升高（均P<0.05）；相关分析显示，血管组织SET8表达水平与钙含量、Caspase-3表达呈负相关（r=-0.948，P<0.01；r=-0.961，P<0.01）。（2）体外实验中，高磷组钙盐沉积明显高于正常组（P<0.05）；流式细胞术检测结果显示，高磷组VSMCs的凋亡率明显高于正常组（P<0.05）；RT-PCR和Western印迹显示，与正常组相比，高磷组SET8和AKT的mRNA和蛋白表达下降，Caspase-3的mRNA和蛋白表达升高（均P<0.05）。（3）干扰SET8基因表达后，VSMCs钙化及凋亡率明显增加，AKT的mRNA和蛋白表达下降，Caspase-3的mRNA和蛋白表达升高（均P<0.05）。 结论 SET8可以抑制血管钙化，其机制之一可能为通过促进AKT活化，抑制Caspase-3的表达，从而抑制VSMCs凋亡，进而参与调控高磷诱导的血管平滑肌细胞钙化。

目的 研究苦参碱对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导腹膜间皮细胞上皮间充质转分化（EMT）后转录因子Snail2的影响。 方法 采用TGF-β1刺激人腹膜间皮细胞并同时予不同浓度苦参碱干预处理，实验分为空白对照组、TGF-β1（5 ng/ml）诱导组、TGF-β1+0.4 mg/ml苦参碱干预组、TGF-β1+0.6 mg/ml苦参碱干预组、TGF-β1+0.8 mg/ml苦参碱干预组和TGF-β1+1.0 mg/ml苦参碱干预组。实时荧光定量PCR和Western印迹检测Snail2、上皮标志分子E钙黏蛋白（E-cadherin）和间质标志分子α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、纤维连接蛋白（FN）、胶原Ⅲ（ColⅢ）的表达，Western印迹检测Smad2、Smad3和细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）的蛋白磷酸化水平。 结果 TGF-β1（5 ng/ml）刺激能上调人腹膜间皮细胞Snail2、α-SMA、FN和ColⅢ mRNA和蛋白的表达水平，上调Smad2、Smad3和ERK1/2的蛋白磷酸化水平，下调E-cadherin mRNA和蛋白的表达水平；苦参碱（0.4、0.6、0.8、1.0 mg/ml）干预处理后能下调Snail2和α-SMA、FN和ColⅢ mRNA和蛋白的表达水平以及ERK1/2的蛋白磷酸化水平，上调E-cadherin mRNA和蛋白的表达水平。 结论 TGF-β1能诱导人腹膜间皮细胞EMT，苦参碱可能通过ERK1/2信号通路下调Snail2的表达水平来抑制TGF-β1诱导的人腹膜间皮细胞EMT。

探讨糖尿病维持性血液透析（MHD）患者并发症的特点。纳入北京清华长庚医院MHD患者为研究对象，按是否合并糖尿病分为糖尿病组和非糖尿病组，比较两组患者透析超滤量、血压、心脑血管事件及并发症的差异。结果显示，糖尿病组平均超滤量、透析前收缩压、内瘘狭窄率、合并心脑血管疾病占比、急性心脑血管事件发病率均高于非糖尿病组。血钙、血二氧化碳结合力、平均死亡年龄低于非糖尿病组。提示MHD合并糖尿病患者容量控制差，透析前血压高，血二氧化碳结合力低，易发生内瘘狭窄和心脑血管事件，死亡年龄较低。

回顾性分析本中心建立上肢人工血管动静脉内瘘的123例患者的临床资料，探讨通畅率的影响因素。结果发现，校正变量后有糖尿病史者和高血压史者初级通畅率降低风险显著增加（P=0.040，P=0.015），而辅助初级通畅率降低风险无明显增加（P=0.288，P=0.155）。因此糖尿病史和高血压病史是人工血管动静脉内瘘初级通畅率降低的独立危险因素，由于各纳入分析因素对次级通畅率无明显影响，故患者相关因素不应成为构建人工血管动静脉内瘘评估中的阻碍。

探讨极低剂量（100 mg）利妥昔单抗治疗难治性肾病综合征的有效性及安全性。回顾性分析7例用单次100 mg利妥昔单抗治疗的难治性肾病综合征患者的临床资料，随访3年，追踪患者病情缓解情况及药物不良反应。结果显示，3例患者实现完全缓解，其中有2位出现复发。1例患者出现输注不良反应；1例患者用药后第16个月时出现肺部感染；1例患者第37个月进入终末期肾脏病。部分难治性肾病综合征患者用极低剂量利妥昔单抗治疗可获完全缓解，药物安全性良好。

腹膜后纤维化（RPF）是一种以腹膜后间隙炎性反应和纤维化为特征的罕见疾病，可以引起输尿管梗阻及急性肾损伤。RPF包括特发性和继发性，目前关于继发性RPF的报道尚不多。溴隐亭是一种麦角生物碱衍生物和多巴胺激动剂，可用于治疗垂体肿瘤、帕金森病、高催乳素血症等。我们首次报道中国大陆因溴隐亭诱发的RPF病例。患者以急性肾损伤、心力衰竭和贫血为主要表现。经血液净化及激素治疗后，患者临床症状缓解，实验室指标恢复正常。

报告1例IgA肾病合并膜性肾病。患者临床肾损害表现为蛋白尿、血尿及肾功能异常，肾组织病理诊断为IgA肾病合并抗磷脂酶A2受体抗体（PLA2R）相关性膜性肾病。半乳糖缺乏IgA1（Gd-IgA1）特异性抗体阳性，亦排除了IgA非特异性沉积的可能。经激素及血管紧张素受体拮抗剂（ARB）等药物治疗后病情快速缓解。提示对于膜性肾病合并肾组织有IgA沉积的患者，除了需排除继发性膜性肾病，鉴别IgA是否为特异性沉积亦具有重要意义，避免不必要的免疫抑制剂使用。

新型冠状病毒肺炎（COVID-19）是新近发现的乙类传染病，不仅表现为以病毒性肺炎为特征的呼吸系统病变，重症患者还合并肾脏、心脏、血液、神经系统等多系统器官损伤。该病自2019年12月在我国暴发以来，目前已蔓延至全球20多个国家和地区，被世界卫生组织（WHO）定义为国际关注的突发公共卫生事件。COVID-19与传染性重症急性呼吸综合征（severe acute respiratory syndrome，SARS，惯称"非典型肺炎"）和中东呼吸综合征（Middle East respiratory syndrome，MERS）均由冠状病毒感染引起，而急性肾损伤（acute kidney injury, AKI）是其重要的并发症之一，早期积极处理与防治十分重要。中华医学会肾脏病学分会专家组对该病合并AKI的流行病学、临床特点、诊断和治疗进行总结并提出有关建议，希望能引起广大肾科医师重视，不断提高本病的防治水平。

肾脏是富含线粒体的器官之一，其正常运行依赖于线粒体氧化磷酸化（oxidative phosphorylation，OXPHOS）为细胞供能。线粒体复合体（mitochondrial complex，MC）构成了线粒体呼吸链（mitochondrial respiratory chain，MRC），具有电子传递和质子转移的功能，参与OXPHOS的过程。近年的研究表明，MC参与了肾脏疾病的发生发展，MC在不同的肾脏疾病中作用不尽相同。本文旨在系统综述MC的功能，总结其在急性肾损伤（acute kidney injury，AKI）、以糖尿病肾病（diabetic kidney disease，DKD）为主的慢性肾脏病（chronic kidney disease，CKD）、肾脏肿瘤、线粒体DNA（mtDNA）疾病等不同肾脏病领域中的作用，分析探讨MC作为新的靶点在肾脏疾病诊治中的潜在价值。

递增式腹膜透析（incremental peritoneal dialysis）从理论上讲更符合生理，是个体化透析的一种范例。这种透析模式是根据个体患者的残余肾功能及其变化而给定动态变化的透析剂量，以维持残余肾和透析总溶质清除达到一恒定量的需求。与标准腹膜透析相比，它更可能保护残余肾功能，带来生存获益。