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基于空间代谢组学筛选口腔鳞状细胞癌转移淋巴结诊断标志物的研究罗观发 卢雯 杨浩悦 杨永琴 赵惠婷 韩伟 杨细虎
中华口腔医学杂志2025年 60卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn112144-20250227-00057
目的
通过解吸电喷雾电离质谱成像(DESI-MSI)空间代谢组学揭示口腔鳞状细胞癌(OSCC)转移淋巴结代谢微环境的改变,探究用于辅助OSCC转移淋巴结临床诊断的代谢标志物。
方法
本研究纳入2020年10月至2022年10月于江苏大学附属医院口腔颌面外科就诊,并接受颈部淋巴结清扫手术的OSCC伴淋巴结转移的6例患者。收集其阳性淋巴结和阴性淋巴结组织样本,采用DESI-MSI技术进行检测,并运用单变量及多元统计分析筛选差异代谢物。通过受试者工作特征曲线(ROC曲线)评估差异代谢物的诊断效能。最后,基于京都基因和基因组百科全书京都基因和基因组数据库(KEGG)进行代谢通路分析,以确定相关代谢通路。
结果
在正离子和负离子模式下,OSCC阳性淋巴结与阴性淋巴结组织中分别鉴定出62种和29种差异代谢物,主要为氨基酸和脂质类物质。筛选其中4种正、负离子模式共有的差异代谢物苯丙氨酸、磷酸乙醇胺、组氨酸和牛磺酸,ROC曲线下面积分别为0.861、0.802、0.729和0.722,诊断效能良好。代谢通路分析表明,OSCC转移淋巴结的代谢微环境中,氨基酸代谢(P=0.469)和甘油磷脂代谢(P=0.006)显著活跃。
结论
本研究基于DESI-MSI技术发现OSCC转移淋巴结组织中存在氨基酸代谢和甘油磷脂代谢紊乱,这些差异代谢物可以作为OSCC淋巴结转移诊断的候选分子。
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桩道参数及扫描辅助材料对两款口内扫描仪体外扫描正确度的影响邹俊斌 黄珂 尹路
中华口腔医学杂志2025年 60卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn112144-20250426-00156
目的
探究不同桩道参数及液体型扫描辅助材料对两款口内扫描仪桩道扫描正确度的影响,以期为临床提供参考。
方法
对残冠桩道模型开口直径和深度及邻牙状态3种变量进行设定,设计桩道开口直径为2.0和2.5 mm,桩道深度为8.0、10.0和12.0 mm,邻牙状态为双侧邻牙存在(A)、单侧邻牙存在(B)和双侧邻牙缺失(C),共计设定18种模型。使用三维打印仪器打印18种树脂模型各1份。结合液体型扫描辅助材料(纳米二氧化钛水溶液),分别使用口内扫描仪A(Trios 5)和B(Primescan connect)对桩道树脂模型进行体外扫描(每种扫描仪扫描每种模型各10次),并将扫描数据依次导入逆向工程软件,以模型原设计数据作为真值,进行最佳拟合对比,计算均方根误差(RMSE)值,对比使用液体型扫描辅助材料前后口内扫描仪对不同形态桩道的扫描正确度。
结果
未涂布液体型扫描辅助材料时,口内扫描仪A仅能识别开口直径-桩道深度-邻牙状态分别为2.0-8.0-ABC、2.5-8.0-ABC、2.5-10.0-ABC的模型,RMSE值为46.5~365.0 μm;涂布液体型扫描辅助材料后RMSE值为46.0~185.0 μm,对2.0-8.0-A、2.5-10.0-A模型的扫描正确度均有100 μm以上的显著提高(均P<0.05),并能额外识别2.5-12.0-C模型。未涂布液体型扫描辅助材料时,口内扫描仪B能识别全部18种模型,RMSE值为38.8~106.0 μm;涂布液体型扫描辅助材料后RMSE值为37.6~110.2 μm,可识别的模型不变。桩道开口直径、桩道深度及邻牙状态均对两款口内扫描仪的桩道扫描正确度有显著影响(均P<0.05);液体型扫描辅助材料对口内扫描仪A桩道扫描正确度有显著影响(P<0.05),对口内扫描仪B桩道扫描正确度无影响(P>0.05)。
结论
口内扫描仪B展现出优异的桩道扫描性能,对临床常见的桩道,扫描正确度均可满足临床要求。口内扫描仪A对桩道的开口直径、桩道深度及邻牙状态有一定要求,对狭长桩道可尝试使用液体型扫描辅助材料以提高桩道扫描正确度
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聚己内酯表面不同粗化程度的曲线形微沟槽结构对小鼠成骨前体细胞体外成骨分化的影响王伟新 雷奕宣 赖颖真 叶海涛 曹梦琳 贺于奇
中华口腔医学杂志2025年 60卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn112144-20250410-00131
目的
通过调控碱蚀刻时间在聚己内酯(PCL)膜表面构建梯度粗化程度的曲线形微沟槽结构,探究表面粗化与曲线形微沟槽结构的协同作用对小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)体外成骨分化的影响,以确定最优的PCL表面复合改性方案。
方法
软光刻及熔融浇铸技术构建表面具有规则排布的曲线形微沟槽结构的聚己内酯膜(CMP),碱蚀刻24、48、72 h。材料分组:光滑组为表面光滑的PCL、CMP组为表面具有曲线形微沟槽的PCL,CMP-24 h组、CMP-48 h组、CMP-72 h组分别为经碱蚀刻处理24、48、72 h的CMP。扫描电镜观察表面形貌,原子力显微镜(AFM)检测表面粗糙度,接触角检测评价表面亲水性。体外培养MC3T3-E1细胞,通过细胞计数(CCK-8)、免疫荧光染色、碱性磷酸酶(ALP)及茜素红染色与定量评价成骨细胞的黏附增殖及成骨分化差异,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测成骨相关基因[ALP、Ⅰ型胶原(COL-1)、Runt相关转录因子2(RUNX-2)、骨钙素、骨桥蛋白(OPN)]的mRNA表达水平。
结果
PCL膜表面可成功构建曲线形微沟槽结构,碱蚀刻后材料表面亲水性改善,粗糙度增加,CMP-72 h组亲水性最好,表面接触角为33.2°±5.5°,与其他组差异均有统计学意义(均P<0.05);CMP-72 h组粗化程度最高,表面粗糙度为(59.966±4.729)nm,与其他组差异均有统计学意义(均P<0.05)。CCK-8 5 d结果显示曲线形微沟槽与不同程度粗糙度可促进细胞增殖:CMP-24 h组(0.292±0.003)与CMP-72 h组(0.383±0.004)细胞增殖均显著大于光滑组(0.270±0.005)(均P<0.05)。免疫荧光染色可见曲线形微沟槽可对细胞产生显著的接触诱导效应,随着碱蚀刻时间的延长,接触诱导效应减弱,ALP染色与茜素红染色结果均提示CMP-48 h组体外成骨染色最深,CMP-48 h组ALP活性(0.013 021±0.000 032)及茜素红定量结果(0.290±0.003)均为最高,与其他组差异均有统计学意义(均P<0.05);CMP-24 h组和CMP-48 h组RUNX-2(分别为1.845±0.087和1.837±0.027)均显著大于其他组(均P<0.05),CMP-24 h组与CMP-48 h组组间差异无统计学意义(P>0.05),CMP-48 h组成骨相关基因mRNA表达均最高,其中ALP(2.194±0.028)、COL-1(1.983±0.024)、骨钙素(7.644±0.156)和OPN(2.648±0.031)均显著大于其他组(均P<0.05)。
结论
本项研究曲线形微沟槽及粗糙度改性方案均可提升PCL膜表面成骨细胞的体外分化,其中碱蚀刻处理曲线形微沟槽48 h促小鼠成骨前体细胞成骨能力最佳,可作为未来PCL膜表面改性方案。
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创伤性颞下颌关节强直小鼠模型的建立李宁 吕天阳 衡玉敏 刘昌奎 郭亚媛 邓天阁 胡开进
中华口腔医学杂志2025年 60卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn112144-20250321-00095
目的
通过复合创伤的方式建立创伤性颞下颌关节强直(TTMJA)小鼠模型,为研究TTMJA的发病机制奠定模型基础。
方法
本研究时间为2024年1月至2025年2月。将42只4周龄C57/BL6小鼠依次编号为1~42,通过计算机生成的随机数序列分为对照组(n=21)和实验组(n=21),实验组选择左侧颞下颌关节(TMJ)进行造模手术,对照组常规饲养无其他特殊处理。术后12周,两组通过一般检查(体重及垂直最大被动开口度)、大体观察、显微CT和组织学染色观察TMJ复合体,评估模型建立情况。
结果
术后12周实验组小鼠的体重[(27.75±1.08)g]与对照组[(30.80±0.29)g]差异无统计学意义(t=0.54,P=0.610),垂直最大被动开口度[(1.70±0.26)mm]较对照组[(3.43±0.21)mm]显著降低(t=8.92,P<0.001)。大体观察显示实验组小鼠右侧TMJ结构正常、左侧 TMJ复合体出现不规则增生。显微CT显示,术后12周实验组小鼠右侧TMJ结构正常、髁突与关节窝规则;左侧髁突与关节窝骨质向关节外侧大量增生成两个不规则的骨块,骨块之间存在未完全钙化的透射带。组织学染色中,对照组小鼠左侧关节间隙内无新生软骨或骨组织,关节盘结构正常;实验组小鼠左侧关节间隙外侧可见明显新生软骨及钙化的骨组织,髁突与关节窝之间形成骨桥连接、关节盘结构消失,形成骨性强直。
结论
本实验通过摘除关节盘、损伤部分关节窝和髁突纤维软骨方式初步建立了C57/BL6小鼠的TTMJA模型,为进一步研究TTMJA的发生机制提供实验载体。
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瞬时受体电位香草素1在碘乙酸钠诱导的大鼠颞下颌关节骨关节炎中的表达变化许利琴 江恒华 龙星 房维
中华口腔医学杂志2025年 60卷 10期
DOI: 10.3760/cma.j.cn112144-20250401-00115
目的
探讨外周及中枢神经系统瞬时受体电位香草素1(TRPV1)的表达在大鼠颞下颌关节骨关节炎(TMJOA)中的变化及其与TMJOA疼痛的关系。
方法
2024年2月至2025年4月期间,将48只健康雄性SD大鼠按随机数表法分成对照组和实验组,每组24只,两组大鼠建模时间分别为2、4、6周,每组不同建模时间点各8只。双侧颞下颌关节(TMJ)关节腔注射碘乙酸钠(MIA)建立TMJOA模型后,收集TMJ髁突、三叉神经节(TG)、三叉神经脊束核(TNC)及海马组织。疼痛阈值检测器von Frey丝评估大鼠头部退缩阈值(HWT),HE染色及显微CT扫描观察TMJ组织学改变。免疫组织化学染色检测TRPV1在TG和海马组织中的表达,以及神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)在TNC中的表达。
结果
建模后第1天大鼠HWT显著降低,然后逐渐升高;从第7天到第14天,HWT再次降低,14 d以后HWT逐渐升高,实验组与对照组各时间点相比差异均有统计学意义(P<0.001)。HE染色及显微CT显示,建模后第2周,髁突骨小梁排列紊乱,骨小梁变细,骨髓腔变大,然后骨小梁变粗,骨髓腔变小。TMJOA大鼠TG中TRPV1阳性细胞数量在建模第2周达到峰值,第4周和第6周逐渐下降,不同建模时间的整体差异有统计学意义(P<0.001);对照组不同建模时间的差异无统计学意义(P=0.941)。TMJOA大鼠TNC中GFAP阳性细胞数量明显升高,GFAP阳性细胞数量在建模第2周达到峰值,第4周和第6周逐渐下降,不同建模时间的整体差异有统计学意义(P<0.001);对照组不同建模时间的差异无统计学意义(P=0.720)。TMJOA大鼠海马中TRPV1阳性细胞数量明显升高。TRPV1阳性细胞数量在建模第2周达到峰值,第4周和第6周逐渐下降,不同建模时间的整体差异有统计学意义(P<0.001);对照组不同建模时间的差异无统计学意义(P=0.776)。
结论
MIA诱导的大鼠TMJOA模型中,大鼠TG和海马组织中TRPV1的表达以及TNC中GFAP的表达上调,可能参与TMJOA疼痛的发生和发展,并与TMJOA病变发展有关。