2012年 · 第47卷第10期

近年来,口腔种植技术在我国迅速普及.具体反映在以下几个方面:种植体用量以两位数的百分比增长;开展种植修复的医疗单位和医师数量迅速增加,已从口腔医学院校扩展到口腔诊所;愿意接受这项技术的患者已从大城市扩展到基层.但是,由于种植临床的发展与医师培养及技术完善的速度不同步,出现了盲目追求经济效益而不顾医疗质量的现象,同时因种植技术导致的医疗纠纷有上升的,趋势.因此,规范种植技术就显得尤为重要。

现代口腔种植修复的临床适应证和受众已经发生了变化,最初口腔种植学是应无牙颌患者进行种植修复的初衷,而现在大多数患者则是修复单颗牙或少数牙缺失.这种变化使人们对种植修复的美学效果提出了更高的要求,甚至达到或超过天然牙支持的传统修复。

目的 评价经上颌骨前外侧壁的上颌窦底提升植骨延期种植术的长期临床效果,并比较两种不同的骨移植材料在种植修复不同时期的变化.方法 对2002年1月至2008年12月牙列缺损患者18例(21侧)上颌窦行经上颌骨前外侧壁的上颌窦底提升植骨延期种植术.延期(6～8个月)植入共46枚种植体.将牙列缺损区域剩余牙槽骨高度＜4 mm的患者分为两组:①混合材料组(自体骨+异种骨)5例6侧；②单纯异种骨组(Bio-Oss)13例15侧.在3个时间点(植骨术后即刻、种植体负荷即刻、＞12个月随访)拍摄曲面体层X线片,评估骨吸收率及种植体存留率.结果 在植入的46枚种植体中,除1枚因感染取出外,其余种植体骨结合良好并完成修复.在平均54个月随访期内,种植体存留率为98％ (45/46).3个时间点的X线片测量比较,移植骨量两组均减少,混合材料组(10.88％和7.77％),总吸收率18.65％；单纯异种骨组(4.40％和-2.47％),总吸收率1.93％.骨量变化的差异有统计学意义.结论 上颌窦底提升植骨的临床效果是可以预期的；单纯异种骨移植的骨吸收率低于自体骨+异种骨混合材料的骨吸收率。

引导骨再生(guided bone regeneration,GBR)是根据各类组织细胞迁移速度不同的特点,创造出促进骨组织优势生长的环境,即:将屏障膜置于软组织与骨缺损之间建立生物屏障、创造一个隔离空间、阻止干扰骨形成且迁移速度较快的结缔组织细胞和上皮细胞进入骨缺损区,允许有潜在生长能力、迁移速度较慢的前体成骨细胞优先进入骨缺损区,优势生长,同时保护血凝块,减缓组织压力,实现缺损区的修复性骨再生。

目的 探讨缺氧对人牙周膜成纤维细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)和组织金属蛋白酶抑制物(tissue inhibitors of matrix metalloproteinase,TIMP) mRNA表达的影响,以期为牙周组织修复再生机制研究提供依据.方法 组织块法培养人牙周膜成纤维细胞,分为缺氧组和常氧组(对照组).缺氧组细胞分别于1％O2、5％ CO2、94％N2的37℃培养箱中培养12、24和48 h(分别为12、24、48 h缺氧组)；常氧组细胞在20％O2、5％ CO2、75％N2的37℃培养箱中培养.采用反转录聚合酶链反应技术检测MMP和TIMP相关基因的表达.缺氧组与常氧组间均数比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD检验.结果 12、24、48 h缺氧组MMP-2 mRNA的表达呈明显递增趋势(分别为0.769±0.038、0.793±0.043、0.865±0.047),均显著高于常氧组(0.294±0.117),P＜0.01；12h缺氧组TIMP-1,2 mRNA的表达(分别为1.870±0.645、0.862±0.043)均有一过性升高,均分别显著高于常氧组TIMP-1,2 mRNA的表达(分别为0.816±0.043、0.426±0.097),P＜0.05.12h缺氧组MMP-1/TIMP-1 mRNA的比值(0.392±0.206)显著低于常氧组(0.859 ±0.126),P＜0.05；24、48 h缺氧组MMP-2/TIMP-2 mRNA的比值(分别为1.091±0.207、1.264±0.377)均显著高于常氧组(0.695±0.255),P＜0.05.结论 缺氧可以导致MMP-1、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2 mRNA的表达,并使MMP-2 mRNA与TIMP-2 mRNA的比值失衡,这可能是缺氧导致牙周炎患者牙周组织破坏加重的机制之一。

目的 研究牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)超声提取物在人牙周膜细胞NF-κB受体激活蛋白配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)和护骨因子表达中的作用,探讨Pg在牙周炎患者牙槽骨吸收中的作用.方法 用含有不同质量浓度(25、50 mg/L) Pg超声提取物的培养液培养人牙周膜细胞6h(分别为25、50 mg/L实验组),以未做处理的人牙周膜细胞作为空白对照组,运用实时定量聚合酶链反应检测细胞中RANKL及护骨因子mRNA的表达,蛋白质印迹法检测细胞中RANKL及护骨因子的蛋白表达,酶联免疫吸附测定法检测细胞培养液中护骨因子蛋白的表达,应用SPSS 13.0统计软件对各组结果进行单因素方差分析,检验水准为双侧α=0.05.结果 Pg超声提取物干预人牙周膜细胞后,25、50 mg/L实验组细胞中RANKL mRNA(分别为0.253±0.033、0.350±0.075)和蛋白的相对表达量(分别为0.782±0.008、1.281 ±0.072)均显著高于空白对照组(分别为0.126 ±0.035、0.240±0.019)(P ＜0.05)；50 mg/L实验组护骨因子mRNA的相对表达量(0.087±0.021)显著低于空白对照组(0.240 ±0.019)(P＜0.01),25、50 mg/L实验组护骨因子蛋白的相对表达量(分别为0.813±0.007、0.398±0.009)与空白对照组(1.131±0.005)相比均显著降低(P＜0.01),培养液中护骨因子蛋白的表达与空白对照组相比差异无统计学意义.结论 Pg超声提取物作用6h后能促进人牙周膜细胞RANKL的表达,抑制护骨因子的表达,从而影响骨代谢。

目的 研究盐酸小檗碱对体外培养的人牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLC)分泌单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的影响,旨在为利用天然药物治疗牙周病提供依据.方法 从离体牙分离牙周膜组织,体外培养人PDLC.经免疫组化鉴定后的人PDLC首先根据细胞培养液中是否含有10 mg/L脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)分为LPS组和无LPS组(NLPS组),然后两组再依据培养液中盐酸小檗碱的终质量浓度(0、0.01、0.02、0.03 g/L)分为LPS空白对照组、LPS 1、2、3组及NLPS空白对照组和NLPS 1、2、3组.应用酶联免疫吸附测定法分别检测各组细胞培养上清液中MCP-1的含量,对多组间结果比较采用方差分析,组间两两比较采用Bonferroni t检验,以双侧P＜0.05为差异有统计学意义.结果 NLPS 1、2、3组MCP-1含量[分别为(11.33±0.16)、(11.45 ±0.53)、(11.25 ±0.14) ng/L]与NLPS空白对照组[(11.32±0.35) ng/L]相比差异均无统计学意义(P值均大于0.05)；LPS 1、2、3组MCP-1含量[分别为(38.14±5.34)、(34.15 ±3.36)、(26.13 ±2.12) ng/L]与LPS空白对照组[(58.42±1.52) ng/L]相比均显著降低,差异均有统计学意义(P值均小于0.001)；LPS 1、2、3组间两两比较差异均有统计学意义(P值均小于0.001).结论 当以LPS作为刺激因子时,盐酸小檗碱抑制体外培养的PDLC分泌MCP-1作用明显,并在一定范围内呈浓度依赖性。

目的 通过分析微创全瓷修复体的美学效果和成功率,初步评价该修复形式的临床应用价值.方法 对30例前牙美学缺陷患者的44颗患牙进行0.5 mm厚度以内的牙体预备或不进行牙体预备,采取长石质陶瓷材料制作全瓷修复体,应用树脂粘接剂粘接.修复后患者采用视觉模拟评分法(visual analogue scales,VAS)评价美学效果满意度；同时,3名修复专业医师对修复后照片进行美学效果评价(边缘美观效果、颜色、形态、半透明度).修复后6、12、24个月复查评价成功率.结果 修复后患者对修复体美学效果的满意度为9.2±0.4；医师美学效果评价中修复体的边缘美观效果、颜色、形态、半透明度优秀率分别为89％(39/44)、91％(40/44)、98％ (43/44)和93％(41/44).修复后6、12、24个月成功率分别为100％(44/44)、98％(43/44)和91％(40/44).结论 微创全瓷贴面修复体具有优秀的美学效果和满意的成功率,在严格掌握适应证的前提下,牙科美学治疗中可采用这种治疗方式。

目的 观察术后施加正畸力时间对犬移植牙牙周愈合的影响,以期为临床提供参考.方法 将4只犬的32颗上下颌切牙进行自体移植手术,分为术后不加力组(对照组)和术后1、2、4周加力4组,术后8周处死动物,将移植牙及牙周组织制作脱钙标本,以垂直于牙长轴方向进行切片,光镜下分别计算每颗牙根表面3种形态:正常牙周膜、牙根吸收和骨性粘连的观察点占全部240个观察点的百分比,比较各组百分比.结果 与对照组相比,术后2周加力组牙根吸收和骨性粘连百分比均降低,骨性粘连降低至2.1％,与对照组(12.5％)差异有统计学意义(P＜0.05).虽然术后1周加力组骨性粘连百分比(6.3％)降低,但牙根吸收增加为68.8％,与对照组(12.5％和41.7％)差异均有统计学意义(P＜0.05).术后4周加力组正常牙周膜的百分比与对照组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 术后2周加力更有利于牙周愈合,过早加力反而不利于牙周愈合。

目的 观察小型猪牙齿发育相关基因Barx1片段在胚胎发育40 d(E40)不同牙胚中的定量表达,探讨Barx1基因空间表达量与牙齿形态的关系.方法 应用基因克隆技术克隆小型猪Barx1基因片段；应用激光捕获显微切割技术精确分离胚胎40 d小型猪第一乳切牙、乳尖牙、第三乳前磨牙、乳磨牙牙胚；提取微量RNA,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶为对照,通过实时定量聚合酶链反应检测Barx1的相对表达量.结果 得到小型猪Barx1基因698个碱基的片段,Barx1在第一乳切牙、乳尖牙、第三乳前磨牙、乳磨牙中的相对表达量为0.000 249、0.000 715、0.026 096、0.1 12 656,在牙弓中由前向后呈递增趋势.结论 Barx1基因表达量与牙齿形态发育存在一定关系,推测小型猪Barx1基因可能与牙尖的分化或牙尖数目相关。

目的 检测钴铬合金含银抗菌涂层的表面性能及细胞毒性,为其临床应用提供依据.方法 于钴铬合金表面应用等离子喷涂技术制备含银抗菌涂层(涂层组),通过扫描电镜、能谱分析及X射线衍射分析表面性能.以常规铸造的钴铬合金试件为合金对照组,利用甲基噻唑基四唑法测试涂层组合金浸提液(分为25％、50％、75％和100％亚组)和合金对照组浸提液以及阴性对照组(新鲜培养液)对小鼠成纤维细胞L929增殖的影响(培养1、2、3d)；用流式细胞术测试阴性对照组、涂层组和合金对照组培养48 h后L929细胞周期的差异.结果 涂层表面均匀致密,与基底材料未见明显间隙,表层主要物相为Ag、Cr和少量的Ag2O、Cr2O3.细胞培养1、2、3d后,阴性对照组、各涂层亚组和合金对照组A值差异无统计学意义(P＞0.05)；阴性对照组各时间点毒性评级均为0级,各涂层亚组和合金对照组各时间点毒性评级均为1级.涂层组G2期细胞周期比例为(8.23±0.39)％,合金对照组G2期细胞周期比例为(8.70±0.46)％,两组间差异无统计学意义(P＞0.05),显著低于阴性对照组[(24.15±0.71)％].结论 钴铬合金含银涂层结构稳定,与临床常用钴铬合金相比,对L929细胞的增殖及细胞周期影响无明显差异,细胞相容性良好。

目的 以猿猴空泡病毒40大T抗原基因( simian virus 40 large tumor antigen,SV40Tag)转染SD大鼠牙囊细胞(rats' dental follicle cells,rDFC)构建无限增殖化rDFC,以期为牙周组织工程研究提供稳定的细胞来源.方法 分离SD大鼠下颌第一磨牙牙胚,组织块法分离培养原代rDFC,免疫组织化学技术鉴定细胞来源.利用脂质体介导含有SV40Tag的质粒pSSR69-pAmpho转染293细胞,取病毒上清液感染rDFC,潮霉素筛选,阳性克隆扩大培养(无限增殖化组)；以未转染细胞作对照组,观察细胞形态,计算细胞群体倍增时间,绘制细胞生长曲线和倍增曲线.反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测rDFC中SV40Tag基因的表达,蛋白质印迹法检测端粒酶表达,计算平板克隆形成率,行软琼脂克隆形成实验及细胞致瘤性实验.对无限增殖化组和对照组细胞群体倍增时间采用两独立样本t检验,对两组细胞平板克隆形成率采用两独立样本率x2检验.结果 无限增殖化rDFC形态与正常rDFC形态无明显差别.无限增殖化rDFC中SV40Tag RT-PCR结果显示在357 bp处有一条特异扩增条带,未转染细胞未见条带,无限增殖化rDFC端粒酶表达显著高于正常细胞.两组rDFC生长曲线无明显差异,倍增曲线显示无限增殖化组rDFC保持了较强的增殖能力.无限增殖化rDFC平板克隆形成率[34％( 33/96)]高于对照组[22％(21/96)],但差异无统计学意义(x2=3.71,P＞0.05),软琼脂内不能形成克隆；两组细胞致瘤性实验均未见肿瘤形成.结论 SV40Tag基因无限增殖化rDFC能在体外长期培养并多次传代,具有相对稳定的增殖特性和功能状态,为良性转化,有望进一步应用于牙周组织工程研究。

乳牙列期牙列相对比较稳定,在这一时期出现的错(牙合)畸形相对较少.与乳牙列期相比,混合牙列期牙列的变化巨大,除了牙齿替换出现的生理性错(牙合)畸形(如恒前牙拥挤、上前牙牙轴外倾、前牙覆(牙合)和覆盖变化)外,还有许多因牙齿发育异常导致的错(牙合)畸形,如上前牙区额外牙(多生牙)导致的前牙拥挤和排列异常、牙齿异位萌出导致的错(牙合)畸形等.当混合牙列出现这些发育异常时,在适宜的时机进行正确处理十分关键,可以避免或减轻恒牙列错(牙合)畸形的发生。

四十多年的临床实践和研究表明,无牙颌种植修复具有咀嚼效率高、固位好、美观舒适的优势[1-4].但是,无牙颌患者多伴骨量不足,需要进行骨增量,植骨手术不仅增加了并发症风险,且由于植骨后无法即刻修复,大大延长了种植修复的疗程.为避免植骨,有学者研究仅在颌骨前部植人种植体,后牙区以悬臂梁的方式修复,临床证实可导致远中种植体负荷增加,加剧骨吸收,长期临床效果不佳[5-6].因此,无牙颌种植即刻修复成为种植修复领域的难题,也是世界上临床研究的热点问题.“All-on-4”旨在使用常规种植体、不需植骨完成无牙颌种植即刻修复。