成骨细胞特异性转录因子osterix在斑马鱼颅颌面发育早期时空表达特征的初步研究黄兴 刘鑫 徐智云 闫娈 杨德琴
中华口腔医学杂志2016年 51卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1002-0098.2016.02.008
目的
探讨成骨细胞特异性转录因子osterix基因在斑马鱼颅颌面发育早期的表达特征,为进一步研究其在颅颌面骨骼和牙齿发育早期的分子调控机制奠定基础。
方法
PCR扩增osterix基因的特异性基因片段,制备地高辛标记osterix基因的反义mRNA探针和正义mRNA探针;通过整胚原位杂交技术检测osterix基因在斑马鱼颅颌面骨骼与牙齿发育早期的转录分布,进一步比较osterix基因在颅颌面骨骼发育中的矿化表达特征;通过茜素红染色突出osterix基因在牙齿发育中的矿化表达特点。
结果
成功合成osterix基因的反义和正义mRNA探针;反义探针杂交检测显示:在受精后3~ 4 d osterix基因开始在斑马鱼颅颌面膜内成骨部位表达,在受精后5~ 6 d osterix基因在牙齿特异性表达;正义探针杂交未检测到osterix基因的表达信号。osterix基因在早期尚未矿化的骨基质以及初代牙齿(3V1、5V1)、第一颗替换牙齿(4V2)的牙基质中高度表达。
结论
提示osterix基因可能在斑马鱼早期未矿化骨基质转化为晚期成熟的矿化骨基质过程中,以及牙齿冠部牙基质发育矿化过程中发挥一定作用。
钛表面载基因纳米囊泡自组装聚电解质多层膜的体外矿化研究滕伟 李湘霞 陈逸铭 黄洪章
中华口腔医学杂志2016年 51卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1002-0098.2016.02.009
目的
研究钛表面构建载基因脂多糖胺纳米囊泡-透明质酸聚电解质多层膜(polyelectrolyte multilayer films,PEM)的体外矿化能力,为钛种植体表面聚电解质膜改性提供理论基础。
方法
利用含骨形成蛋白2基因质粒(plasmid of bone morphogenetic protein-2, pBMP-2)的脂多糖胺纳米囊泡(lipopolysaccharide-amine nanopolymersomes, LNP)(简称pLNP)作为阳离子聚电解质,透明质酸(hyaluronic acid,HA)作为阴离子聚电解质,采用层层自组装技术,在钛表面构建PEM,记为Ti-pLNP-(HA-pLNP)n,其中HA和pLNP在钛表面依次组装1次为1个组装循环,n为组装循环数。采用模拟体外矿化实验,检测光滑钛组(Ti)、碱热处理组(Ti-OH)、层层自组装Ti-pLNP-(HA-pLNP)4组(最外层为pLNP,简称Ti-C4)和Ti-pLNP-(HA-pLNP)4.5组(最外层为HA,简称Ti-C4.5)表面矿化物的性质、形貌和化学成分,评价聚电解质多层膜的体外矿化能力。
结果
X射线衍射光谱显示Ti、Ti-OH、Ti-C4和Ti-C4.5组表面在25.82°、31.90°和32.90°位置均出现了羟基磷灰石的特征衍射峰。其中Ti-OH和Ti-C4组衍射峰明显高于其他两组;场发射扫描电镜可见Ti-C4和Ti-C4.5组膜表面均匀沉积一层尺寸较大的颗粒状物,部分聚集成团片状,但钛基底仍然可见;X射线能谱显示Ti-C4和Ti-C4.5组膜表面晶状物Ca、P元素含量较接近,占总量的77.24%和64.23%,明显高于Ti组表面。
结论
钛表面载基因纳米囊泡自组装聚电解质多层膜具有促进体外矿化的能力。
牙周炎患者种植修复体机械并发症及菌斑控制的相关性分析谢也斯 孟焕新 韩劼 潘韶霞 张立 释栋
中华口腔医学杂志2016年 51卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1002-0098.2016.02.002
目的
评估牙周健康者和牙周炎患者种植固定修复后机械并发症的发生情况,分析种植体软组织乳头充满情况与食物嵌塞和种植修复体清洁效果的关系。
方法
随访复查2009年12月至2012年12月于北京大学口腔医学院·口腔医院牙周科行种植治疗且固定修复1年以上的患者103例,记录种植体机械并发症、菌斑指数、食物嵌塞、软组织乳头指数等,并复查X线片。根据初诊时牙周情况分为牙周健康组(健康组,30例)、轻中度牙周炎组(轻中度组,36例)及重度牙周炎组(重度组,37例),χ2检验或精确概率法比较3组机械并发症的发生率;根据复查时种植体软组织乳头充满情况分为充满组(61例)和未充满组(93例),χ2检验及Mann-Whitney U检验比较两组食物嵌塞和菌斑清洁情况。
结果
种植体存留率为100%(162/162),机械并发症的发生率为9.9%(16/162),无种植体折断或基台折断等严重并发症。健康组、轻中度组、重度组3组间机械并发症的发生率差异无统计学意义;充满组与未充满组食物嵌塞发生率差异无统计学意义(P>0.05)。健康组中,充满组种植体颊侧菌斑指数[0(0)]显著小于未充满组[1(1)](P<0.05);重度组中,充满组种植体的舌侧菌斑指数[1(1)]显著大于未充满组[0(1)](P<0.05 )。
结论
通过规范的牙周治疗和种植修复治疗,牙周炎患者种植体短期存留率和修复体机械并发症的发生率与牙周健康者无明显差异;对于组织缺损明显的重度牙周炎患者,修复体外形设计更应利于患者的口腔卫生维护,应慎重、适度采用关闭邻间隙的设计。
玻璃纤维增强复合树脂牙周夹板粘接修复前牙缺失的四年临床观察肖遵胜 姜婷 方晓倩 吕品 李健 贾璐
中华口腔医学杂志2016年 51卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1002-0098.2016.02.003
目的
评价玻璃纤维增强复合树脂粘接义齿修复前牙缺失的临床存活率并分析其影响因素。
方法
选择1~3颗前牙缺失、缺牙区邻牙牙周支持丧失严重、不符合种植义齿及全冠固位固定义齿修复条件的30例患者,制作玻璃纤维(Everstick C&B)增强复合树脂粘接义齿30个。采用树脂粘接系统(Superbond C&B)进行粘接固定修复。在修复即刻、修复后1、2、3、4年分别对义齿的完全存活率、功能存活率、基牙牙槽骨高度进行记录和评估,分析失败原因。采用完全随机的单因素方差分析及卡方检验分析基牙骨高度变化。
结果
修复1~3年后,每年分别出现义齿连接体折裂1例,经过树脂修补后继续使用。第3、4年各有1例连接体再次折裂后义齿整体脱落。4年随诊后,30例玻璃纤维增强复合树脂粘接义齿的完全存活率为83%(25/30),功能存活率为93%(28/30)。22%(13/60)的邻牙骨高度降低,而另外78%(47/60)的邻牙骨高度增加,与修复后第1年相比差异有统计学意义(P< 0.05),邻牙牙周状况得到改善。
结论
4年临床观察显示,对于1~3颗前牙缺失合并邻近基牙牙周支持受损的患者,玻璃纤维增强复合树脂粘接义齿是一种可行的固定修复方式。
蔗糖环境下细胞外DNA对变形链球菌生物膜形成的影响李毓勤 杜媛 叶静 王斌 刘颖
中华口腔医学杂志2016年 51卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1002-0098.2016.02.004
目的
研究脱氧核糖核酸酶Ⅰ (deoxyribonuclease I, DNaseⅠ)在蔗糖环境下对不同生长时期变形链球菌生物膜的影响,初步探讨蔗糖环境下细胞外DNA (extracellular DNA,eDNA)对变形链球菌生物膜形成的作用。
方法
在1%蔗糖环境下,体外光滑玻片上建立变形链球菌生物膜模型,37 ℃、微需氧环境(5%O2、85%N2、10% CO2)下静置培养。样本分为4组,分别培养至6、12、24及48 h,每组均设两个亚组,即对照组(不予DNaseⅠ处理)和DNaseⅠ处理组,其中DNaseⅠ处理组于结束培养前1 h加入终浓度为100 U/ml的DNaseⅠ以降解eDNA。培养结束后,以SYTO-9/PI混合染料对生物膜进行双荧光染色。以激光共聚焦显微镜分层扫描生物膜样本,Imaris软件对图像进行三维重建并测量其总生物量、生物膜厚度及红色荧光代表的eDNA和膜受损细菌量。
结果
1%蔗糖环境下,变形链球菌黏附及分布密度逐渐增加,生物膜总生物量和厚度均随时间增加,24 h时红色荧光标记的eDNA及膜受损细菌量达峰值。6、12、24及48 h DNaseⅠ处理组的变形链球菌生物膜与相应时间点对照组相比,生物膜总生物量均显著减少(P<0.05),减少比例依次为81.3%、85.0%、90.1%和12.4%;12、24及48 h DNaseⅠ处理组变形链球菌生物膜与相应时间点对照组相比,生物膜厚度均显著减小(P<0.05),减小比例依次为34.4%、45.6%和23.6%,6 h DNaseⅠ处理组与对照组变形链球菌生物膜厚度差异无统计学意义(P>0.05);除48 h外,各时间点DNaseⅠ处理组生物膜的eDNA及膜受损细菌量均较相应对照组显著减少(P<0.05)。
结论
1%蔗糖环境下,在变形链球菌生物膜形成6、12、24及48 h,eDNA对其生物膜形成均具有促进作用。
丝氨酸蛋白酶HtrA1在人牙周膜组织中的表达及对人牙周膜细胞增殖的影响李冉 张旗
中华口腔医学杂志2016年 51卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1002-0098.2016.02.005
目的
观察丝氨酸蛋白酶HtrA1在人牙周膜组织中的表达,探讨其在人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells ,hPDLC)增殖中的作用。
方法
收集武汉大学口腔医学院口腔颌面外科门诊拔除的12至25岁健康前磨牙6颗和第三磨牙3颗,要求牙根完整、无龋坏和牙周组织炎症,反转录PCR和免疫组化染色方法分别检测HtrA1在人牙周膜组织中的mRNA和蛋白的表达,组织块法体外培养原代hPDLC,甲基噻唑基四唑比色法检测细胞增殖。用慢病毒转染的方法获得HtrA1基因过表达和基因沉默稳定细胞株,并以空载体慢病毒为对照,然后分别在培养的第1、3、5、7、9 d,细胞计数CCK-8试剂盒(cell counting kit-8, CCK-8)检测HtrA1对hPDLC增殖的影响。
结果
反转录PCR结果显示HtrA1 mRNA在人牙周膜组织中呈阳性表达,免疫组化染色结果显示HtrA1蛋白在人牙周膜组织中也呈阳性表达,并主要表达于hPDLC胞质和胞外基质中。hPDLC经体外培养后生长曲线符合该细胞生长特征。慢病毒成功将HtrA1基因过表达和基因沉默后,CCK-8检测结果显示体外培养1、3、5、7、9 d后,分别与各自的空载体对照组相比,过表达HtrA1使hPDLC的增殖速率显著减弱(A值分别为0.897±0.060、0.890±0.083、1.631±0.038、1.111±0.041、1.110±0.189),而基因沉默HtrA1后hPDLC增殖速率显著加快(A值分别为0.329±0.021、0.529±0.044、0.973±0.056、1.626±0.102、2.344±0.198)(P< 0.05)。
结论
HtrA1在mRNA和蛋白水平均表达于人牙周膜组织中,并对hPDLC的增殖起重要调节作用。
自酸蚀粘接流动树脂初始应用层厚度对牙本质粘接强度的影响傅昭然 蔡雪 田福聪 王晓燕
中华口腔医学杂志2016年 51卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1002-0098.2016.02.006
目的
研究自酸蚀粘接流动树脂(DyadFlow ,DF )初始应用层厚度对牙本质粘接性能的影响。
方法
选取离体人磨牙20颗,制备牙本质试件,将牙本质试件分为4组。G 0.5、G1.0、G2.0直接使用DF,初始应用层厚度分别为0.5、1.0和2.0 mm; GOB配合使用OptiBond All in One (OB)自酸蚀粘接剂后再使用DF,初始应用层厚度为2.0 mm。4组上部均充填复合树脂,然后制备截面积为1 mm× 1 mm的条形试样并测定微拉伸粘接强度,每组试样均为15个。扫描电镜观察4组牙本质-树脂界面的形态及断裂类型。
结果
GOB、G 0.5、G1.0及G2.0组微拉伸粘接强度依次减小,分别为(20.19± 3.11)、(8.65±1.58)、(6.65±1.13)及(5.70±0.60)MPa, 4组间总体比较及两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。G 0.5、G1.0、G2.0及GOB组粘接断裂类型为混合破坏B2型(DF自酸蚀粘树脂与牙本质混合破坏)的样本比例分别为14/15、13/15、14/15及13/15。
结论
直接使用DF自酸蚀粘接流动树脂,其与牙本质的粘接强度随材料初始应用层厚度增加而降低。
两种配比纳米羟基磷灰石复合胶原材料对犬拔牙窝骨缺损修复效果的比较王彦夫 王程越 王绍刚 崔福斋
中华口腔医学杂志2016年 51卷 02期
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1002-0098.2016.02.007
目的
比较两种配比的纳米羟基磷灰石复合胶原材料(nano-hydroxyapatite/collagen,nHAC)在犬拔牙窝硬组织修复中的作用,以期为nHAC的临床应用提供参考。
方法
按纳米羟基磷灰石和Ⅰ型胶原构成比分别为3∶7(A组)和5∶5(B组)制备人工骨支架材料,取18只健康成年雄性杂种犬,拔除下颌双侧第二前磨牙,植入A组或B组材料(每组12侧),以不进行处理的自然愈合侧为阴性对照组(C组,12侧)。分别于术后1、3和6个月(每组每个时间点4侧)行螺旋CT扫描测量颌骨高度及CT值,取材行大体观察、组织学观察及X射线显微镜观察并比较拔牙窝骨小梁体积分数及孔隙率。
结果
nHAC植入牙槽骨后,材料降解吸收,新骨不断生成。术后3个月A组颌骨高度[(15.76± 0.28)mm]、CT值[(879±31)HU]、骨小梁体积分数[(22.2±0.4)%]均显著高于B组[分别为(14.88±0.36)mm、(718±29)HU和(20.3±0.4)%],而孔隙率[(23.6±0.8)%]则显著低于B组[(27.6±0.6)%] (P<0.05);C组颌骨高度[(13.77±0.34)mm]、CT值[(588±35)HU]及骨小梁体积分数[(17.4±0.6)%]均显著低于A、B组,且孔隙率[(39.4±0.7)%]显著高于A、B组(P<0.05)。
结论
纳米羟基磷灰石和Ⅰ型胶原构成比为3∶7的nHAC更利于促进成骨,促进拔牙窝骨组织修复。