2001年 · 第21卷第06期

目的调查放射性皮肤溃疡中端粒酶逆转录酶的表达状况与癌变及难于愈合的可能关系.方法应用兔抗人端粒酶逆转录酶抗体TRT和免疫组化SP方法检测24例福尔马林固定、石蜡包埋的人慢性放射性皮肤溃疡,5例正常皮肤,2例烧伤皮肤溃疡,8例肿瘤标本,观察TRT的表达和定位情况.结果 TRT表达阳性率为58.3%(14/24),其中强阳性占41.7%(10/24),弱阳性为16.7%(4/24),阴性为41.7%(10/24).阳性部位主要定位于表皮鳞状上皮细胞核及胞质;小血管平滑肌、血管内皮细胞、毛细血管内皮细胞和纤维母细胞多为阴性或弱阳性;浸润的慢性炎细胞如浆细胞和淋巴细胞呈阳性.TRT强阳性表达多见于病程长、增生旺盛及肥厚的表皮组织,而病程短、萎缩的表皮组织多呈阴性或弱阳性.8例肿瘤组织均为强阳性,5例正常皮肤及2例烧伤皮肤溃疡均为阴性.结论提示与辐射有关的TRT表达状况可能与放射性皮肤溃疡癌变为鳞状细胞癌的分子机理有关;可能与放射性皮肤溃疡小血管硬化、毛细血管及纤维母细胞贫乏即肉芽组织生成不良导致病变难于愈合的机理相关.

目的检测室内高氡暴露地区居民肺癌p53和k-ras基因突变.方法采用PCR扩增、PCR-SSCP电泳和序列分析方法.结果 9例标本中有5例p53PCR-SSCP电泳呈阳性结果,其中3例经克隆测序发现有碱基置换.结论室内氡浓度在200～350 Bq.m-3.a-1范围内的7例肺癌病例中有5例发生p53基因突变,p53基因突变还可能与肺癌患者的年龄及吸烟史有关.

目的在获得了低剂量辐射诱导新基因RIG1 EST片段的基础上,简便、有效地获得其全长cDNA,进行下一步的基因功能研究.方法结合应用非克隆cDNA文库技术及增强RACE技术,设计了巢式RACE PCR、生物素磁性分离、生物素标记探针杂交、再次磁性分离的纯化流程.结果成功地克隆到RIG1 EST片段3′端约1 kb的序列,该序列3′端具有明显的polyA加尾信号,有编码区的终止密码子.进一步的分析明确了RIG1 EST的正、负链及其蛋白编码方向,为RIG1 5′端的克隆提供了大量可靠的信息,目前RIG1 5′端的克隆已得到很好的进展.结论所得结果与我们的设计完全一致,说明这一技术路线是简便可行的,为下一步研究RIG1基因在细胞辐射应激反应中的功能及被辐射诱导表达的调控模式奠定了基础.

目的研究不同剂量X射线全身照射对小鼠派伊氏板细胞凋亡的影响及作用机理.方法采用反转录PCR法检测了派伊氏板细胞Bcl-2转录水平的变化,并用琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术检测了不同剂量X射线全身照射后小鼠派伊氏板细胞DNA及凋亡小体的改变.结果 2 Gy X射线全身照射使派伊氏板细胞凋亡增多,Bcl-2转录水平表达下降;而75 mGy X射线全身照射使派伊氏板细胞凋亡减少,同时Bcl-2转录水平表达升高.结论 Bcl-2参与了辐射诱导小鼠派伊氏板细胞凋亡的基本调控.

目的研究辐射对人T淋巴细胞白血病细胞系(CEM)、外周血单个核细胞的hHR21sp基因转录表达水平的影响及意义.方法分别对人T淋巴细胞白血病细胞系CEM和正常人外周血单核细胞在UV或γ辐射后不同时间提取细胞总RNA,通过RT-PCR与hHR21sp基因特异引物杂交,以β-actin为内参照放射影像密度扫描检测人T淋巴细胞白血病细胞系CEM、单核细胞DNA修复基因表达.结果在UV-辐射、γ-辐射后早期(3～6 h),人T淋巴细胞白血病细胞系CEM和淋巴细胞hHR21sp基因的表达水平明显增加,照射后6 h hHR21sp基因的表达水平增加最多且UV辐射更明显,在晚期(9 h)降低.比较人细胞系CEM和淋巴细胞两者hHR21sp基因的表达水平,γ辐射(3 Gy)后淋巴细胞对hHR21sp基因表达高于人细胞系CEM,且表达增加时间较长,达9 h;而人细胞系CEM受到γ辐射后早期表达增加,在6～9 h后表达降低.结论人T淋巴细胞白血病细胞系(CEM)和人淋巴细胞的DNA修复基因hHR21sp基因在一定剂量辐射(UV、γ辐射)范围内其表达水平随辐射剂量增加而诱导表达水平增高,且对UV辐射更敏感;提示hHR21sp基因在人细胞系CEM细胞和人单核细胞在照射损伤后表达增加,可能是促进单核细胞损伤修复的原因之一.

目的探讨电离辐射对伤口巨噬细胞(MΦ)离子通道活动的影响及W11-a12对其的作用.方法采用电生理膜片钳cell-attached离子单通道记录方法.结果与单伤组相比,复合伤组伤口MΦ的通道自发性开放的细胞数显著降低;以氯离子为载体的阴离子通道及以钾离子为载体的阳离子通道表现为开放概率降低;平均开放时间常数缩短;平均关闭时间常数延长.W11-a12能增加两伤类组伤口MΦ氯、钾离子通道自发开放.结论电离辐射抑制MΦ膜上离子通道的活动可能是其抑制MΦ功能的一个重要途径.W11-a12可减弱电离辐射的这一抑制作用.

目的研究致癌物氨基甲酸己酯作用下,持续低剂量率γ射线照射(PLDRR)对两代小鼠肺肿瘤形成的干预作用和肿瘤细胞增殖、p53抗癌基因表达的调节.方法 20 μGy/min×42 d137Cs γ射线照射两代昆明种小鼠,化学致癌物单次腹部皮下注射量为:2 000 mg/kg,观察肺肿瘤的形成,免疫组化分析肺肿瘤组织PCNA 和p53抗癌基因.结果 PLDRR并未明显干预化学致癌物对肺肿瘤的形成,实验组与对照组肺肿瘤发生率分别为94%和95.83%,差异无显著性(P>0.05 χ2=0.004),但在PLDRR下受精、怀孕及出生后仍在该环境中生长发育的仔代小鼠肺肿瘤发生率仅为56.60%,明显低于祖代小鼠肺肿瘤发生率(P<0.01 χ2=20.81),瘤体直径和平均发瘤数也低于祖代小鼠.仔鼠突变型p53蛋白产物和PCNA的表达显著下降.结论 PLDRR可诱发仔代小鼠对肺肿瘤的"适应性反应",仔代小鼠肿瘤细胞增殖能力降低.

目的研究重组人Flt3配体(rhFL)及其他细胞因子在体外对免疫细胞的抗辐射作用及其可能机理.方法用流式细胞仪分析照射前后外周血单个核细胞(PBMC)表型及rhFL对受照射PBMC表型的影响.[3H]-TdR测定细胞的增殖能力.PBMC来源贴壁细胞经细胞因子诱导树突状细胞(DC),并观察辐射对诱导DC的影响及rhFL对DC的抗辐射效应;用PI-Annexin V、DNA Ladder分析细胞凋亡.结果 PBMC在体外经15 Gy照射后,CD8+、CD56+细胞明显减少,照射前细胞培养液中加入100 ng/ml rhFL,可促进CD56+细胞的恢复;照射前应用rhFL及照射后联合应用IL-2等细胞因子,可促进受照射CD8+、CD56+细胞的恢复;rhFL可协同GM-CSF、IL-4、TNFα产生DC,并使DC细胞的数量较常规方法诱导产生的数量增加6倍,而且rhFL对DC分化诱导的辐射抑制作用具有明显的抗性;rhFL可抑制照射所致的细胞凋亡.结论 rhFL单独或与其他细胞因子联合应用,对人外周血免疫细胞具有明显的抗辐射效应,这对辐射损伤机体免疫功能的调节和恢复具有重要的使用价值.

目的探讨60Co γ射线对不同p53基因功能状态的人淋巴性恶性肿瘤细胞株8226和Raji凋亡相关基因Bcl-xL、Bax的作用及其分子机理.方法分别运用流式细胞仪技术(FACS)、DNA片段释放法、RT-PCR和MTT法,分析了8226、Raji中Bcl-xL、Bax转录相对表达与辐照诱导的细胞凋亡率及抑制细胞增殖的关系.结果 8226和Raji在照射后Bcl-xL、Bax转录表达均迅速上升,于4～8 h达到高峰,而后开始下降,于24～48 h恢复至辐照前水平;8226中Bcl-xL转录较Raji持续时间为长;且Bcl-xL/Bax的比率影响靶细胞辐照后的细胞凋亡和抑制细胞增殖.结论肿瘤细胞株p53基因状态与辐射敏感性相关,两个等位基因突变的细胞株8226比一个等位基因突变的细胞株Raji更具辐射抗性,这种辐射抗性的不同与肿瘤细胞Bcl-xL、Bax的表达及二者比率有关.

目的探讨EGFR、Bax、Rb在高能电子线大鼠皮肤辐射损伤中的作用及机理,为临床治疗提供线索.方法运用免疫组化技术SP法检测EGFR、Bax、Rb在40例高能电子线大鼠皮肤辐射损伤模型中的表达,分析它们与照射剂量之间的关系.结果①EGFR在40例照射的大鼠中,5、15、30、45 Gy组阳性表达率分别为20%、40%、70%、100%;各照射剂量组间有显著相关性(P<0.05).② Bax在40例照射的大鼠中,5、15、30、45 Gy组阳性表达率分别为30%、30%、70%、70%;各照射剂量组同Bax蛋白阳性表达无相关性,但有趋势性(P<0.05).③Rb在40例照射的大鼠中,5、15、30、45 Gy组阳性表达率分别为30%、20%、40%、30%;各照射剂量组间Rb阳性表达无线性趋势性(P>0.05).④本实验对40例各照射剂量组实验对象进一步研究发现Bax+/Rb+共有9例,EGFR+/Rb+/Bax+共有5例,均无共同阳性趋势.结论实验表明电离辐射能增加大鼠皮肤组织中EGFR、Bax、Rb蛋白的表达;EGFR、Bax蛋白的表达可能与照射剂量有关;EGFR能促进细胞的增殖与Bax、Rb蛋白促细胞凋亡共同作用下,参与放射性皮肤损伤的形成.

目的制订合理的临床分级方法,指导选择正确的治疗方案.方法回顾性总结20年140例脾外伤的临床资料.根据临床表现、临床检查的影像标准和术中脾损伤的程度三个量化指标制订的分类标准.将脾外伤分为暴发型、隐匿型和普通型三个类型.并讨论指出这三种不同类型脾外伤临床诊断和处理的特点.结果由于制订了合理的临床分级标准,指导临床对脾外伤的处理,较10年前提高了治愈率,降低了术后并发症和术后病死率,同时也提高了保脾手术的成功率.结论在脾破裂的治疗中,虽然抢救生命第一,保留肝脏第二,但适时选择行保脾手术是明智的.

目的建立秦山核电厂周围20公里范围内居民健康状况数据库.方法通过各疾病监测点上报的"居民死亡医学证明书",结合回顾性调查,获取相关数据.结果 1988～1999年居民死亡率为6.92‰,呼吸系统居死因首位,循环系统、恶性肿瘤位居第2、3位;男性、女性前5位死因均为呼吸系统、循环系统、恶性肿瘤、损伤和中毒、消化系统;居民恶性肿瘤死亡率为121.33/10万(标化率为100.13/10万),肝癌居首位,肺癌、胃癌位居第2、3位;白血病是少儿期、青年期恶性肿瘤的主要死因,中年期为肝癌、肺癌,老年期为肺癌、肝癌.结论呼吸系统、循环系统等慢性非传染性疾病已是居民的主要死因,恶性肿瘤死亡率低于省疾病监测点的监测结果.

目的研究90年代初我国第一个核电站商业运行前我国居民经食物、饮水和空气途径的年氚摄入量和氚致待积有效剂量.方法根据我国食物和环境氚调查的氚浓度数据、我国居民空气、饮水和食物摄入量数据和ICRP72号出版物推荐的剂量系数,用MS Office软件进行计算和归因分析.结果计算了氚致我国各地区成年、少年、幼儿组经诸途径的年氚摄入量和待积有效剂量.我国成人、少年和幼儿平均每年的氚摄入量分别为16 200,11 600和8 040 Bq/a,氚致待积有效剂量分别为0.53,0.52和0.75 μSv/a.结论我国氚致居民剂量的主要来源是食物,特别是食物中的有机结合氚,食物氚致剂量对3个年龄组平均约占87%.